醫(yī)藥用級維生素B2/核黃素原料藥GMP認(rèn)證
本品為7,8-二甲基-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-四羥基戊基]-3,10-二氫苯并蝶啶-2,4-二T。按干燥品計(jì)算,含C17H20N4O6應(yīng)為97.0%~103.0%。
【性狀】 本品為橙黃色結(jié)晶性粉末;微臭;溶液易變質(zhì),在堿性溶液中或遇光變質(zhì)更快。
本品在水、乙醇、三LV甲烷或乙M中幾乎不溶;在稀氫氧化鈉溶液中溶解。
比旋度 避光操作。取本品,精密稱定,加無碳酸鹽的0.05mol/L氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5mg的溶液,在30分鐘內(nèi),依法測定(通則0621),比旋度為-115°至-135°。
【鑒別】?。?)取本品約1mg,加水100ml溶解后,溶液在透射光下顯淡黃綠色并有強(qiáng)烈的黃綠色熒光;分成二份:一份中加無機(jī)酸或堿溶液,熒光即消失;另一份中加連二亞硫酸鈉結(jié)晶少許,搖勻后,黃色即消褪,熒光亦消失。
?。?)取含量測定項(xiàng)下的供試品溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定,在267nm、375nm與444nm的波長處有最大吸收。375nm波長處的吸光度與267nm波長處的吸光度的比值應(yīng)為0.31~0.33;444nm波長處的吸光度與267nm波長處的吸光度的比值應(yīng)為0.36~0.39。
(3)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜(光譜集447圖)一致。
【檢查】 酸堿度 取本品0.50g,加水25ml,煮沸2分鐘,放冷,濾過,取濾液10ml,加酚酞指示液0.05ml與氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)0.4ml,顯橙色,再加鹽酸滴定液(0.01mol/L)0.5ml,顯黃色,再加甲基紅溶液(取甲基紅50mg,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液1.86ml與乙醇50ml的混合液溶解,加水稀釋至100ml,即得)0.15ml,顯橙色。
感光黃素 取本品25mg,加無醇三LV甲烷10ml,振搖5分鐘,濾過,濾液照紫外-可見分光光度法(通則0401),在440nm的波長處測定,吸光度不得過0.016。
有關(guān)物質(zhì) 照高效液相色譜法(通則0512)測定。避光操作。
供試品溶液 取本品約15mg,置100ml量瓶中,加冰醋酸5ml與水75ml,加熱溶解后,加水適量稀釋,放冷,再用水稀釋至刻度,搖勻。
對照溶液 精密量取供試品溶液1ml,置50ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。
系統(tǒng)適用性溶液 取維生素B2約15mg,置500ml量瓶中,加冰醋酸5ml與水200ml,置水浴上加熱,并時(shí)時(shí)振搖使溶解,加水適量稀釋,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻。
色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.01mol/L庚烷磺酸鈉的0.5%冰醋酸溶液-乙腈-甲醇(85:10:5)為流動(dòng)相;檢測波長為444nm;進(jìn)樣體積20μl。
系統(tǒng)適用性要求 系統(tǒng)適用性溶液色譜圖中,理論板數(shù)按維生素B2峰計(jì)算不低于2000。
測定法 精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的3倍。
限度 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰,單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(1.0%),各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液的主峰面積(2.0%),小于對照溶液主峰面積0.01倍的色譜峰忽略不計(jì)。
干燥失重 取本品0.5g,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過1.0%(通則0831)。
熾灼殘?jiān)〔坏眠^0.2%(通則0841)。
【含量測定】 照高效液相色譜法(通則0512)測定。避光操作。
供試品溶液 取本品約15mg,精密稱定,置500ml量瓶中,加冰醋酸5ml與水200ml,置水浴上加熱,并時(shí)時(shí)振搖使溶解,加水適量稀釋,放冷,再用水稀釋至刻度,搖勻。
對照品溶液 取維生素B2對照品約15mg,精密稱定,置500ml量瓶中,加冰醋酸5ml與水200ml,置水浴上加熱,并時(shí)時(shí)振搖使溶解,加水適量稀釋,放冷,再用水稀釋至刻度,搖勻。
色譜條件 見有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下。
系統(tǒng)適用性要求 理論板數(shù)按維生素B2峰計(jì)算不低于2000。
測定法 精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。
【類別】 維生素類藥。
【貯藏】 遮光,密封保存。
【制劑】 (1)維生素B2片?。?)維生素B2注射液
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