SuperBoost 試劑盒使用簡便,可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn) ICC、IHC 或 FISH 實驗方案輕松靈活調(diào)整,適用于任意類型的細(xì)胞或組織。使用 SuperBoost 試劑盒標(biāo)記的細(xì)胞適用于任意類型的顯微鏡,可生成高分辨率的多重分析圖像。該特定試劑盒配備 AlexaFluor 488 酪胺鹽(激發(fā)/發(fā)射波長 496/524),使用標(biāo)準(zhǔn)綠色/FITC/GFP 濾光片立方進(jìn)行檢測。該試劑盒還含有多聚 HRP 標(biāo)記的山羊抗小鼠 IgG 二抗。
SuperBoost 試劑盒的功能包括:
?通過熒光成像以出色的靈敏度檢測低水平或難以檢測的靶標(biāo)
? 采用標(biāo)準(zhǔn)濾光片的簡單實驗方案和檢測
? 適用于高分辨率多通路圖像—與 DAPI、二抗和其他 SuperBoost 試劑盒共標(biāo)記
? 需要的一抗量是標(biāo)準(zhǔn) ICC/IHC/ISH 實驗的 1/10-1/100
SuperBoost 試劑盒基于酪胺信號放大系統(tǒng),該系統(tǒng)使用辣根過氧化物酶 (HRP) 的催化活性原位生成靶蛋白或核酸序列的高密度標(biāo)記。使用 SuperBoost 試劑盒進(jìn)行的典型 ICC/IHC/ISH 實驗所需的一抗量為標(biāo)準(zhǔn) ICC/IHC/ISH 實驗的 1/10-1/100。SuperBoost 試劑盒可提供遠(yuǎn)高于背景的特異性信號強(qiáng)度,因此可以輕松優(yōu)化實驗方案,以便從觀測到較高的內(nèi)源性自發(fā)熒光的樣品中檢測特異性信號
SuperBoost 試劑盒的優(yōu)點
利用 Alexa Fluor 酪胺增強(qiáng)信號:SuperBoost 試劑盒利用可與 HRP 反應(yīng)的 Alexa Fluor 酰胺,最終將明亮、光穩(wěn)定的 Alexa Fluor 染料沉積在周圍蛋白質(zhì)和其他類似分子上。SuperBoost 試劑盒是款能夠集 Alexa Fluor 染料的亮度與酪胺信號放大的增強(qiáng)功能于一身,以生成優(yōu)異的信號的試劑盒。
Poly-HRP 優(yōu)點:與 TSA 不同,SuperBoost 試劑盒采用了 poly-HRP 偶聯(lián)的二抗。在此系統(tǒng)中,多種 HRP 酶與短鏈聚合物偶聯(lián),比常規(guī) HRP 系統(tǒng)將信號增強(qiáng)數(shù)倍。poly-HRP 的結(jié)構(gòu)形式使抗體能夠像常規(guī) HRP 偶聯(lián)二抗一樣,有效透過細(xì)胞或組織。酶/抗體蛋白的摩爾比的平均值為“4”。
反應(yīng)終止液:與任何基于酶的標(biāo)記系統(tǒng)一樣,此系統(tǒng)也會發(fā)生信號過溢的情況。SuperBoost 試劑盒包含 HRP 終止液,可終止 HRP 反應(yīng)??衫?HRP 終止液獲取盡可能高的信號,同時又不會導(dǎo)致背景信號升高。使用優(yōu)化的 HRP 反應(yīng)時間生成的圖像與使用標(biāo)準(zhǔn) ICC/IHC/ISH 方法產(chǎn)生的圖像一樣清晰,但前者的靈敏度是后者的 10-200 倍。
背景減少:SuperBoost 試劑盒包含用于消除或減少內(nèi)源性過氧化物酶和熒光背景信號的封閉劑。這些封閉劑有助于確保僅增強(qiáng)特異性信號,同時阻斷非特異性/背景信號。