人胰蛋白酶原激活肽ELISA試劑盒

QY-RM01309    人胰蛋白酶原激活肽ELISA試劑盒    human TAP ELISA Kit 人胰蛋白酶原激活肽ELISA試劑盒 
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標(biāo)本的保存

一般說來，在 5 天內(nèi)測定的標(biāo)本可放置于 4℃，超過一周測定的需低溫凍存。

對收集后當(dāng)天進行檢測的標(biāo)本，儲存在  4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本， 將標(biāo)本及時分裝后放在  -20 ℃ 或  -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。 標(biāo)本  2 -8 ℃ 可保存  48 小時，-20 ℃ 可保存  1 個月。-70 度可保存  6 個月。部分標(biāo)本也可加入適當(dāng)防腐劑，激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。標(biāo)本的處理 可用作 ELISA 測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進行測定，有些則需經(jīng)預(yù)處理。

◆ 血清：   

室溫血液自然凝固  10-20 分鐘后，離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn)  / 分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。   

◆ 血漿：   

應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇  EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入  10 ％（  v/v ）抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或  1% heparin 或  2.0%EDTA.Na2) 混合  10-20 分鐘后，離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn)  / 分）。仔細(xì)收集上清如有沉淀形 成，應(yīng)再次離心。   

◆ 尿液、胸腹水、腦脊液：   

用無菌管收集。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn)  / 分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。   

◆ 細(xì)胞培養(yǎng)上清：   

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn)  / 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的 成份時，用  PBS （  PH7.2-7.4 ）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到  100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。   

◆ 細(xì)胞：

檢測細(xì)胞的成份時，對于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5 分鐘，取上

清，即可進行后續(xù)操作。

◆ 組織標(biāo)本：   

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的  PBS或組織蛋白萃取試劑，緩沖液中可加入蛋白酶抑制劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉(zhuǎn)  / 分）。仔細(xì)收集上清置于  -20 度或  - 70 度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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