α-酮戊二酸是微生物三羧酸循環(huán)中重要的代謝中間產(chǎn)物，是連接細(xì)胞內(nèi)碳-氮代謝的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，在循環(huán)中的位置位于異檸檬酸之后以及琥珀酰輔酶 A 之前。在這一部位，回補(bǔ)反應(yīng)可以通過自谷氨酸的轉(zhuǎn)氨基作用產(chǎn)生α-酮戊二酸而達(dá)到補(bǔ)充此中間代謝產(chǎn)物的目   的。
α-酮戊二酸含量測(cè)定原理：
α-酮戊二酸與衍生劑反應(yīng)，產(chǎn)生紫外下有吸收的物質(zhì)，利用高效液相色譜法分離，紫  外檢測(cè)器測(cè)定其含量。
α-酮戊二酸含量測(cè)定需自備的實(shí)驗(yàn)用品：
高效液相色譜儀（C18 柱，紫外檢測(cè)器）、低速離心機(jī)、超聲波清洗器、溶劑抽濾裝置、濾膜（水系和有機(jī)系各 1 個(gè)，0.45μm）、針頭式過濾器（水系，50 個(gè)，0.22μm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50 個(gè)，2mL）、甲醇（色譜級(jí)）、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀和超純水。
試劑的組成和配制：
實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作：
α-酮戊二酸的提?。?br />稱取約 0.2g 樣本，放入研缽中磨碎，加入 0.2mL 預(yù)冷的試劑一，以及 0.5mL 預(yù)冷的超純水， 移入 EP 管內(nèi)，4 oC 浸提 60min，10000g，4 oC 離心 10min，提取上清液。
α-酮戊二酸的衍生反應(yīng)：
α-酮戊二酸含量標(biāo)準(zhǔn)品的配制：

齊一生物擁有多臺(tái)高效液相色譜儀、氣象色譜儀、液質(zhì)聯(lián)動(dòng)儀，可以提供完善的代測(cè)檢測(cè)服務(wù)。能為各位老師、同學(xué)提供完善的檢測(cè)服務(wù)，提供全套圖譜、原始數(shù)據(jù)和全套檢測(cè)計(jì)算過程及結(jié)果。