亞克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒，不含感受態(tài)細胞

亞克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒可提供高效、5 分鐘的一步克隆策略（“TOPO™ 克隆”），用于將 Taq 聚合酶–擴增 PCR 產物直接插入一個質粒載體上以進行亞克隆。每個試劑盒使用含便利限制性位點的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體進行亞克隆。根據您的需要和預算，您可選擇含多種感受態(tài)細胞或不含感受態(tài)細胞的克隆試劑盒。用于亞克隆的 TOPO™ TA 克隆™試劑盒的特點：

•快速且簡便—從 PCR 至克隆僅需3步，手動操作時間短至5分鐘
• 高效—可獲得高達 95% 含正確插入片段的克隆
• 久經考驗—在過去十余年中性能可靠，引用次數超過4,000次
• 簡單—不需要連接酶、PCR 后程序或含有特異性序列的 PCR 引物

用于亞克隆的 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒—概述

• 載體：pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體—含15個便利限制性位點（位于您插入片段側翼）的亞克隆載體，可輕松實現定向亞克隆
• 克隆方法：TOPO™ TA Cloning™ —含 3′-A 突出端（Taq 聚合酶擴增）的 PCR 產物與含 T 突出端的 TOPO™ 載體基于拓撲異構酶 I 進行5分鐘連接–
• 感受態(tài)細胞：多種選項—從包含一般、高效、噬菌體 T1 抗性或快速生長型感受態(tài)細胞的試劑盒中選擇或使用您的自有細胞–

pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體—簡化克隆和亞克隆
pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體使用 3'-胸苷 (T) 突出端進行線性化以直接連接 Taq 聚合酶–擴增 PCR 產物 (TA cloning™)，并使用共價結合拓撲異構酶 I 進行“活化”。無需添加連接酶，在5分鐘內即可完成克隆。位于 PCR 產物插入位點側翼的 EcoRI 位點，可實現插入片段的簡便切除或使用任何位于 PCR 插入片段側翼的 15 個便利限制性位點的任意組合，可輕松實現定向亞克隆。

pCR™ 2.1-TOPO™ TA 克隆選擇和操作
pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體包含氨芐和抗性標記物以及用于藍/白斑篩選的 LacZα 基因。

簡化的基于 TOPO™ 的克隆
使用 TOPO™ 克隆技術，無需使用含有特異性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、載體制備或其他耗時長的 DNA 操作步驟。只需將 PCR 反應產物直接添加至提供的拓撲異構酶帶電載體中，孵育 5 分鐘，并使用大腸桿菌感受態(tài)細胞進行轉化。

高效克隆
攜帶所需插入片段的克隆高達 95%，您可以篩選更少的克隆體，從而節(jié)省時間和成本。該試劑盒中使用的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體含有 3'-T 突出端，用于高效連接含 3'-A 突出端的 Taq 聚合酶–擴增 PCR 產物。

克隆標準
在克隆方面，TOPO™ 克隆技術已作為一種可靠技術供成千上萬的科學家使用達十余年。快速、簡單易用且高效的 TOPO ™克隆已在多種應用中應用于多種不同載體。

用于亞克隆的TOPO™ TA 克隆™試劑盒—試劑盒選項
根據您的需求，測序用 TOPO™ TA 克隆™試劑盒可與提供不同優(yōu)勢的多種感受態(tài)細胞一起購買：

• 一般克?。? 細胞（貨號K4500-01、K4500-40）
•高效克?。? Electrocomp™ 細胞（貨號號 K4560-01、K4560-40）
• 一般克隆，噬菌體 T1 抗性：DH5α-T1R 細胞（貨號 K4520-01、K4520-40）
• 快速生長：Mach1™ -T1R 化學感受態(tài)大腸桿菌（貨號 K4510-20）
• 自行提供：靈活性高且可節(jié)省成本（貨號 450641）

我們還提供2個版本的試劑盒，包括 PureLink™ 快速質粒小提試劑盒（貨號 K4500-02 和 K4510-02）用于分離清潔、已完成測序的重組質粒。