醫(yī)藥用硫酸慶大霉素化學(xué)原料藥有備案
醫(yī)藥用硫酸慶大霉素化學(xué)原料藥有備案
本品為慶大霉素C1、C1a、C2、C2a等組分為主混合物的硫酸鹽。按無水物計算,每1mg的效價不得少于590慶大霉素單位。 【性狀】 本品為白色或類白色的粉末;無臭;有引濕性。 本品在水中易溶,在乙醇、丙酮或乙中不溶。 比旋度 取本品,精細(xì)稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋度為+107°至+121°。 【鑒別】 (1)取本品與慶大霉素規(guī)范品,分別加水制成每1ml中含2.5mg的溶液,照薄層色譜法(通則0502)實驗,汲取上述兩種溶液各2μl,分別點于同一硅膠G薄層板(臨用前于105℃活化2小時)上;另取三甲烷-甲醇-氨溶液(1:1:1)混合振搖,放置1小時,分取下層混合液為展開劑,展開,取出于20~25℃晾干,置碘蒸氣中顯色,供試品溶液所顯主斑點數(shù)、位置和顏色應(yīng)與規(guī)范品溶液主斑點數(shù)、位置和顏色相同。 (2)在慶大霉素C組分測定項下記載的色譜圖中,供試品溶液各主峰保存時間應(yīng)與規(guī)范品溶液各主峰保存時間分歧。 (3)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜(光譜集485圖)分歧。 (4)本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反響(通則0301)。 以上(1)、(2)兩項可選做一項。 【檢查】 酸度 取本品,加水制成每1ml中含40mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應(yīng)為4.0~6.0。 溶液的廓清度與顏色 取本品5份,各0.4g,分別加水5ml使溶解,溶液應(yīng)廓清無色;如顯混濁,與1號濁度規(guī)范液(通則0902第一法)比擬,均不得更濃;如顯色,與黃色或黃綠色2號規(guī)范比色液(通則0901第一法)比擬,均不得更深。 硫酸鹽 取本品約0.125g,精細(xì)稱定,加水100ml使溶解,用濃氨溶液調(diào)理pH值至11,精細(xì)參加氯化鋇滴定液(0.1mol/L)10ml及酞紫指示液5滴,用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定,留意堅持滴定過程中的pH值為11, 滴定至紫色開端消褪,加乙醇50ml,繼續(xù)滴定至紫藍(lán)色消逝,并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。每1ml氯化鋇滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于9.606mg硫酸鹽(SO4),本品含硫酸鹽按無水物計算應(yīng)為32.0%~35.0%。 有關(guān)物質(zhì) 精細(xì)稱取西索米星對照品和小諾霉素規(guī)范品各適量,加活動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含西索米星和小諾霉素各25μg、50μg和100μg的溶液,作為規(guī)范品溶液(1)、(2)、(3)。照慶大霉素C組分項下的色譜條件實驗,精細(xì)量取規(guī)范品溶液(1)、(2)、(3)各20μl,分別注入液相色譜儀,記載色譜圖,計算規(guī)范品溶液濃度對數(shù)值與相應(yīng)峰面積對數(shù)值的線性回歸方程,相關(guān)系數(shù)(r)應(yīng)不小于0.99;另精細(xì)稱取本品適量,加活動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含慶大霉素2.5mg的溶液,同法測定,記載色譜圖至慶大霉素C1峰保存時間的1.2倍,供試品溶液色譜圖中如有西索米星峰、小諾霉素峰,用相應(yīng)的線性回歸方程計算西索米星、小諾霉素的含量。含西索米星不得過硫酸慶大霉素2.0%,小諾霉素不得過3.0%。除硫酸峰和亞硫酸峰外 (必要時用硫酸鹽和亞硫酸鹽定位),其他雜質(zhì)峰按西索米星線性回歸方程計算,單個雜質(zhì)得過2.0%,總雜質(zhì)不得過4.5%。供試品溶液色譜圖中小于0.1%的雜質(zhì)峰疏忽不計。 水分 取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過15.0%。 熾灼殘渣 不得過0.5%(通則0841)。 慶大霉素C組分 照高效液相色譜法(通則0512)測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(pH值順應(yīng)范圍0.8~8.0);以0.2mol/L三氟醋酸溶液-甲醇(96:4)為活動相;流速為每分鐘0.6~0.8ml;蒸發(fā)光散射檢測器(高溫型不分流形式:漂移管溫度為105~110℃,載氣流量為每分鐘2.5L;低溫型分流形式:漂移管溫度為45~55℃,載氣壓力為350kPa)測定。取慶大霉素規(guī)范品、小諾霉素規(guī)范品和西索米星對照品各適量,分別加活動相溶解并稀釋制成每1ml中約含慶大霉素總C組分2.5mg、小諾霉素0.1mg和西索米星25μg的溶液,分別量取20μl注入液相色譜儀,慶大霉素規(guī)范品溶液色譜圖應(yīng)與規(guī)范圖譜分歧,西索米星峰和慶大霉C1a峰之間,慶大霉素C2峰、小諾霉素峰和慶大霉素C2a峰之間的別離度均應(yīng)契合規(guī)則;西索米星對照品溶液色譜圖中主成分峰峰高的信噪比應(yīng)大于20;精細(xì)量取小諾霉素規(guī)范品溶液20μl,連續(xù)進(jìn)樣5次,峰面積的相對規(guī)范偏向應(yīng)契合請求。 測定法 精細(xì)稱取慶大霉素規(guī)范品適量,加活動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含慶大霉素總C組分1.0mg、2.5mg、5.0mg的溶液,作為規(guī)范品溶液(1)、(2)、(3)。精細(xì)量取上述三種溶液各20μl,分別注入液相色譜儀,記載色譜圖,計算規(guī)范品溶液各組分濃度對數(shù)值與相應(yīng)峰面積對數(shù)值的線性回歸方程,相關(guān)系數(shù)(r)應(yīng)不小于0.99;另精細(xì)稱取本品適量,加活動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含慶大霉素2.5mg的溶液,同法測定,用慶大霉素各組分的線性回歸方程分別計算供試品中對應(yīng)組分的量(CtCx),并按下面公式 計算出各組分的含量(%,mg/mg),C1應(yīng)為14%~22%,C1a應(yīng)為10%~23%,C2a+C2應(yīng)為17%~36%,四個組分總含量不得低于50.0%。 式中Cx為慶大霉素各組分的含量(%,mg/mg); CtCx為由回歸方程計算出的各組分的含量(mg/ml); mt為供試品重量(mg); Vt為體積(ml)。 依據(jù)所得組分的含量,按下面公式計算出慶大霉素各組分的相比照例。C1應(yīng)為25%~50%,C1a應(yīng)為15%~40%,C2a+C2應(yīng)為20%~50%。 式中Cx'為慶大霉素各組分的相比照例。 細(xì)菌內(nèi)毒素 取本品,依法檢查(通則1143),每1mg慶大霉素中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.50EU。(供注射用) 【含量測定】 精細(xì)稱取本品適量,加滅菌水定量制成每1ml中約含1000單位的溶液,照抗生素微生物檢定法(通則1201)測定??尚畔蘼什坏么笥?%。1000慶大霉素單位相當(dāng)于1mg慶大霉素。 【類別】 氨基糖苷類抗生素。 【貯藏】 密封,在枯燥處保管。