利用斑馬魚模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類雌激素物質(zhì)

利用斑馬魚模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類雌激素物質(zhì)【評(píng)價(jià)原理】

OECD近年大力推崇的“有害結(jié)局路徑"（Adverse Outcome Pathway，AOP）毒性評(píng)估策略來測(cè)試類雌激素這一大類有害物質(zhì)。本方法參照糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO，2000）關(guān)于雌激素物質(zhì)日攝取量來評(píng)估測(cè)試物的安全性，通過轉(zhuǎn)基因標(biāo)記技術(shù)表達(dá)的綠色熒光蛋白含量來量化類雌激素物質(zhì)含量，綠色熒光蛋白特異性地在肝臟表達(dá)，一旦供試品中含一定量的類雌激素化學(xué)物質(zhì)，雌激素轉(zhuǎn)基因斑馬魚暴露后肝臟部位會(huì)出現(xiàn)綠色熒光，可用綠色熒光量化供試品中的類雌激素物質(zhì)含量，從而達(dá)到檢測(cè)效果。
利用斑馬魚模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類雌激素物質(zhì)【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組，分別是正常對(duì)照和供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

攝入供試品一段時(shí)間后，我們?cè)跓晒怙@微鏡下觀察斑馬魚肝臟熒光。

【結(jié)果展示】

圖1.含類雌激素物質(zhì)的供試品處理后斑馬魚熒光表型圖

黃色曲線部位為肝臟，綠色熒光量化類雌激素含量

可以看到，攝入供試品組肝臟部位有明顯的綠色熒光。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，攝入含類雌激素物質(zhì)的供試品組斑馬魚肝臟熒光明顯，與正常對(duì)照組存在明顯差別。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品含有類雌激素物質(zhì)。