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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> AS632194水土中亞硝酸鹽含量測(cè)試盒(比色法)
產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) | 規(guī)格 | 100管/96樣、50管/48樣 |
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級(jí)別 | 其他 |
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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632194 | 水土中亞硝酸鹽含量測(cè)試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS632194 | 水土中亞硝酸鹽含量測(cè)試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測(cè)定意義:
亞硝酸鹽廣泛存在于水體和土壤中,不僅是有機(jī)氮分解的重要中間產(chǎn)物,也可能來自污染。人體攝入過量后,可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。
測(cè)定原理:
在酸性條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物,再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,室溫保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
土壤樣品:準(zhǔn)確稱取過篩后的土壤約0.2g,加入1 mL 提取液,室溫震蕩1h,8000g,25℃離心15min,靜置,待其分層后,取上清液待測(cè)。
水樣:直接檢測(cè);如果渾濁,可以離心后再測(cè)定。
測(cè)定步驟和操作表:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表
測(cè)定管 | 空白管 | |
提取液(µL) | 70 | |
樣品(µL) | 70 | |
試劑一(µL) | 65 | 65 |
試劑二(µL) | 65 | 65 |
混勻,25℃靜置15min,于微量石英比色皿/96孔板中檢測(cè)540nm處吸光值A(chǔ)。 △A=A測(cè)定 - A空白 |
注意:空白管只需測(cè)定一次。
亞硝酸鹽含量計(jì)算:
用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x為標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸濃度(μg/ml) y為吸光值A(chǔ)。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.07mL;W:樣品質(zhì)量,g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991 x為標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸濃度(μg/ml) y為吸光值A(chǔ)。
NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.07mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
試劑盒2-8℃保存。
試劑對(duì)人體有一定的危害,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套操作。
若檢測(cè)出得OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍外,請(qǐng)將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)臐饪s或稀釋(A540 <0.09濃縮,A540 > 1.5 適當(dāng)稀釋)。
檢出限為0.5μg/g。
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