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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321309 | 土壤羥胺還原酶(HR)測試盒(比色法) | 100管/48樣 |
AS6321309 | 土壤羥胺還原酶(HR)測試盒(比色法) | 50管/24樣 |
測定意義
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。
測定原理
硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。
試劑組成和配制
試劑一:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加4mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體12mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑六:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑七:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干,過 30~50 目篩。
測定操作表
空白管 | 對照管 | 測定管 | |
風干土樣(g) | 0.02 | 0.02 | |
試劑一(μL) | 40 | 40 | |
蒸餾水(μL) | 40 | ||
試劑二(μL) | 40 | 40 | 40 |
試劑三(μL) | 120 | 120 | 120 |
混勻后,用N2氣流排除管中空氣,立即密封,于30℃反應1h | |||
試劑四(μL) | 80 | 80 | 80 |
充分震蕩10min,8000rpm,25℃,離心10min | |||
上清液(μL) | 20 | 20 | 20 |
試劑五(μL) | 40 | 40 | 40 |
試劑六(μL) | 20 | 20 | 20 |
試劑七(μL) | 20 | 20 | 20 |
蒸餾水(μL) | 100 | 100 | 100 |
充分混勻,25℃靜置顯色10min,用蒸餾水調零,于微量石英比色皿/96孔板測定510nm各管吸光值,分別記為A空白管、A標準管、A對照管、A測定管,△A=A空白管-(A測定管-A對照管)。 |
計算公式
a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線:y = 0.185x -0.1828,R2 = 0.9992
酶活定義:每克土壤每天轉化1μg羥胺為一個酶活力單位。
HR活性(μg/d /g土樣)=(△A+ 0.1828)÷ 0.185×V反總÷W÷T
= 36.32×(△A+0.1828)÷W
b. 使用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線:y = 0.0925x -0.1828,R2 = 0.9992
酶活定義:每克土壤每天轉化1μg羥胺為一個酶活力單位。
HR活性(μg/d /g土樣)=(△A+ 0.1828)÷ 0.0925×V反總÷W÷T
=72.64×(△A+0.1828)÷W
V反總:加入提取液體積,0.28mL;W:樣本質量,g;T:1/24h
注意事項
土壤表層溶解氧濃度較大,取樣應取表層5cm以下的土壤,否則酶活性較低或者測定不到。
試劑三盡量不要敞口放置,取完立即加蓋擰緊。
反應體系最好能用氮吹儀排除溶解氧,若無此裝置,則加入試劑三后立即密封,于30℃反應1h。
公司正在出售的產(chǎn)品:
flagellin ELISA Kit | Enah/Vasp樣蛋白ELISA試劑盒 |
ARG2 ELISA Kit | IgG-Fc片段結合蛋白ELISA試劑盒 |
G抗原10ELISA試劑盒 | Metaxin3蛋白ELISA試劑盒 |
Lebercilin蛋白ELISA試劑盒 | N-乙酰硫suan酯meiELISA試劑盒 |
大鼠抑制suB(INH-B)ELISA檢測試劑盒 | 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA Kit |
胎兒血紅蛋白ELISA試劑盒 | 人信號傳導子及轉錄激活子1(STAT1)試劑盒ELISA |
人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)檢測試劑盒elisa | Nesprin3蛋白ELISA試劑盒 |
人異質性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒 | 通草染料法PCR鑒定試劑盒 |
金黃地鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒 | 三日瘧原蟲PCR試劑盒 |
大腸桿菌通用PCR試劑盒(含致病性和非致病性) | 人腺病毒D26型PCR試劑盒 |
札如病毒型PCR檢測試劑盒 | 酵母菌屬通用PCR試劑盒 |
副流感病毒Ⅲ型PCR檢測試劑盒 | AR 大鼠角化細胞內分泌因子ELISA檢測試劑盒 |
CD30 人白細胞分化抗原30ELISA檢測試劑盒 | 解脲脲原體PCR試劑盒 |
CD209分子(CD209)ELISA試劑盒 | 薩比亞病毒PCR檢測試劑盒 |
血管緊張suⅡ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒 | CC趨化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)ELISA試劑盒 |