比較所有可用的 Bradford 測定›
• 靈活—可與含或不含去污劑的樣品兼容
•樣品體積—僅需 10 µL 用于微孔板程序
•比色—在 595 nm 處使用標(biāo)準分光光度計或酶標(biāo)儀測量
•即用型—單一試劑;無需制備工作試劑
•測定時間— 在室溫下孵育 10 分鐘
•測定范圍—在 2 至 1500 µg/mL 范圍內(nèi)檢測蛋白濃度
與 Bradford 方法相似,考馬斯染料在酸性培養(yǎng)基中與蛋白結(jié)合,導(dǎo)致吸收值立即從 465 nm 變化至 595 nm,伴色從綠色變?yōu)樗{色。此外,該測定只需 10 分鐘即可完成。
蛋白檢測可以以試管或微孔板的形式進行。標(biāo)準工作范圍為 100 – 1500 µ-g/mL,含 1% 的去污劑(或者在某些情況下更高)。蛋白濃度通過參考針對一系列標(biāo)準蛋白稀釋獲得的吸光度而估算得出,通常是牛血清白蛋白 (BSA),這些蛋白與未知樣品一起測定。由于考馬斯染料的顏色響應(yīng)與蛋白濃度增加呈非線性,必須在每次測定中完成標(biāo)準曲線。標(biāo)準品可以直接使用,無需在供試樣品中發(fā)現(xiàn)的相同去污劑中制備。
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