重組蛋白 A/G 的特點(diǎn):
?包含蛋白 A 的四個(gè) Fc 結(jié)合結(jié)構(gòu)域和蛋白 G 的兩個(gè) Fc 結(jié)合結(jié)構(gòu)域
? 與蛋白 A 或蛋白 G 識(shí)別的所有抗體類(lèi)別和亞類(lèi)結(jié)合
蛋白 A/G 的擴(kuò)展 Fc 結(jié)合特性使其成為免疫球蛋白研究和純化的常用工具。蛋白 A/G 能結(jié)合所有人類(lèi) IgG 亞類(lèi)、IgA、IgE、IgM 以及能在較小程度上結(jié)合 IgD;但是不能結(jié)合小鼠 IgA、IgM 或鼠血清白蛋白。蛋白 A/G 是純化和檢測(cè)小鼠 IgG 亞類(lèi)單克隆抗體的出色工具,不會(huì)受到其他這些血清蛋白的干擾。單個(gè)亞類(lèi)的小鼠單克隆抗體與此嵌合蛋白的親和力很可能強(qiáng)于與蛋白 A 或蛋白 G 的親和力。
重組蛋白 A/G 的特性:
? 來(lái)源:大腸桿菌
? 分子量:50,460(使用 SDS-PAGE 測(cè)量的表觀 MW:40,000-45,000)
?形式:無(wú)鹽粉末
?0.1% 溶液的 A280:~0.505
? 等電點(diǎn) (pI):4.65
蛋白 A 和蛋白 G 的 Fc 結(jié)合結(jié)構(gòu)域的基因融合導(dǎo)致產(chǎn)生結(jié)構(gòu)和功能嵌合蛋白,結(jié)合范圍比單獨(dú)的蛋白 A 或蛋白 G 更廣泛。在融合過(guò)程中,不需要針對(duì)血清白蛋白結(jié)合位點(diǎn)的蛋白 G 基因序列編碼。該蛋白在大腸桿菌中表達(dá),并在發(fā)酵過(guò)程中分泌至周?chē)囵B(yǎng)基中。所獲得的產(chǎn)物在質(zhì)量和得率方面一致,因?yàn)榧?xì)菌宿主被設(shè)計(jì)為缺乏主要的蛋白水解活性。其結(jié)合的 pH 值依賴(lài)程度小于單獨(dú)的蛋白 A 或蛋白 G,在 pH 值 5 至 8 下結(jié)合良好。
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