海腎-螢火蟲熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn):
•同時(shí)—對(duì)兩種熒光素酶活性同時(shí)進(jìn)行基于過(guò)濾器的波長(zhǎng)分離檢測(cè)
• 靈敏—測(cè)量同一樣品中的綠色海腎和紅色螢火蟲熒光素酶活性
• 快速—與傳統(tǒng)的序貫雙測(cè)定不同,無(wú)需淬滅步驟
• 多重分析—可以對(duì)同一樣品中的兩種細(xì)胞活性進(jìn)行定量
Pierce 海腎-螢火蟲熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的測(cè)定,支持同時(shí)檢測(cè)海腎和紅色螢火蟲熒光素酶活性。海腎熒光素酶充當(dāng)一個(gè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因,以組成型活化的紅色螢火蟲作為一種歸一化對(duì)照。如以下動(dòng)畫視頻所示,該報(bào)告基因?qū)φ战M合可在單次讀碼測(cè)定中同時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因和對(duì)照熒光素酶的活性,無(wú)需雙步驟添加底物試劑或淬滅。該測(cè)定工作溶液包含兩種熒光素酶的底物,且在反應(yīng)的同時(shí)出現(xiàn)閃光型動(dòng)力學(xué)。所產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)可以使用過(guò)濾器進(jìn)行光譜解析。在單個(gè)樣品中,研究人員可以測(cè)定調(diào)節(jié)元素的轉(zhuǎn)錄活性、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及活化劑或抑制劑的影響。
包括:
細(xì)胞裂解緩沖液、反應(yīng)緩沖液以及底物腔腸素和 D-螢光素
需要:
綠色海腎和紅色螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因;濾光片組的波長(zhǎng)為 525±20nm(對(duì)于綠色海腎 Luc)和 615 至 675nm(對(duì)于紅色螢火蟲 Luc)。光度計(jì)或其他能夠監(jiān)測(cè)發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光微孔板讀數(shù)儀);一次評(píng)估超過(guò) 24 孔所需的進(jìn)樣器。
應(yīng)用:
•同時(shí)研究?jī)煞N調(diào)節(jié)元素
• 同時(shí)監(jiān)測(cè)兩條信號(hào)通路
• 每次篩選可研究多個(gè)靶標(biāo)(例如脫靶效應(yīng))
綠色海腎熒光素酶可產(chǎn)生比螢火蟲和天然海腎熒光素酶更明亮的生物發(fā)光信號(hào)。綠色海腎熒光素酶蛋白產(chǎn)生的生物發(fā)光信號(hào) (λmax= 535nm) 是由腔腸素氧化引起的。第二項(xiàng)測(cè)定使用紅色螢火蟲熒光素酶是日本源氏螢火蟲熒光素酶源氏螢的突變形式。該熒光素酶產(chǎn)生了一種紅移輻射光譜 (λmax= 613nm),它是由 D-熒光素在 ATP 存在的情況下氧化引起的。
更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
• 熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定的同步雙發(fā)射檢測(cè)
相關(guān)產(chǎn)品
Pierce™ 海腎螢火蟲熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒