•通過熒光計(jì)檢測低至 3.5 x 10-7 單位 (~0.5 pg) 的 RNase A
• 簡單、直接的30分鐘測定
• 在蛋白純化過程中監(jiān)測柱分離組分的 RNase 活性
• 與 DNaseAlert™ 一起用于定量檢測同一樣品中的 RNase 和 DNase
RNaseAlert™ QC 系統(tǒng)使用一種新型 RNA 底物,其一端標(biāo)記有熒光報(bào)告基因分子 (fluor),另一端標(biāo)記有淬滅基團(tuán)。在不存在 RNase 的情況下,淬滅劑的物理接近會將 fluor 中的熒光抑制到極低水平。然而,當(dāng) RNA 酶存在時(shí),RNA 底物被裂解,fluor 和淬滅劑在溶液中的空間上是分離的。這導(dǎo)致 fluor 在被適當(dāng)波長的光激發(fā)時(shí)發(fā)出明亮的綠色信號。熒光可以很容易地通過基于過濾器或單色器的熒光計(jì)檢測到。由于 RNaseAlert™ 底物的熒光在 RNase 活性存在時(shí)會逐漸增加,因此可對使用熒光計(jì)監(jiān)測得到的結(jié)果進(jìn)行動力學(xué)評估。RNaseAlert™ 底物的序列經(jīng)過仔細(xì)優(yōu)化,可檢測幾種 RNase,包括 RNase A、RNase T1、RNase I、微球菌核酸酶、S1 核酸酶、綠豆核酸酶和 Benzonase™。
快速便利的方案
RNaseAlert™ 程序僅需幾分鐘即可設(shè)置完成。凍干的熒光底物復(fù)溶于提供的管中,并與檢測溶液一起孵育幾分鐘。然后用熒光計(jì)讀取結(jié)果。與陰性對照品相比明顯發(fā)熒光的樣品已受到污染,不應(yīng)與 RNA 一起使用。提供無核酸酶水和 RNase A 以用作對照品。
配件產(chǎn)品:
RNaseAlert™ 也兼容 Ambion™ DNaseAlert™ QC 系統(tǒng) (SKU# AM1970)。由于 DNaseAlert™ 底物包含與 RNaseAlert™ 不同光譜的熒光標(biāo)記,因此兩種試劑盒可以同時(shí)與熒光計(jì)一起使用,對單個(gè)樣品中的 RNase 和 DNases 進(jìn)行定量實(shí)時(shí)分析。