肺炎支原體ELISA檢測試劑盒 使用說明書
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人肺炎支原體(MP)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
[實(shí)驗(yàn)原理]
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肺炎支原體(MP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肺炎支原體(MP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
[樣本處理及要求]
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
[需要而未提供的試劑和器材]
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水或去離子水
[試劑盒組成]
預(yù)防措施
個人衛(wèi)生:勤洗手、使用紙巾或肘部遮掩口鼻咳嗽或打噴嚏,避免與患者密切接觸,是預(yù)防支原體感染的基本措施。
環(huán)境衛(wèi)生:保持生活和工作環(huán)境的清潔和通風(fēng),可以減少病原體的傳播。
避免密集場所:在支原體感染流行季節(jié),盡量避免去人群密集的地方,以減少感染的風(fēng)險。
早診早治:出現(xiàn)呼吸道感染癥狀時,應(yīng)及時就醫(yī),早期診斷和治療可以防止病情惡化。
支原體感染的管理主要依靠臨床癥狀的觀察和治療,目前還沒有針對支原體的疫苗。因此,采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施,加強(qiáng)個人和公共衛(wèi)生是控制支原體感染傳播的關(guān)鍵。
健侖生物部分生物試劑——
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