◆能量監(jiān)視器
◆數(shù)字電表
◆基于微處理器和可編程,數(shù)字式顯示功率,包括處理時(shí)間、剩余處理時(shí)間、溫度、脈沖激發(fā)時(shí)間和次數(shù)、實(shí)際功率、振幅等
◆10小時(shí)流程計(jì)時(shí)器
◆具備脈沖激發(fā)功能,獨(dú)立開關(guān),脈沖激發(fā)時(shí)間1秒至59秒可調(diào)節(jié)
◆可變功率輸出控制
◆密封式變頻器,隔離水汽、灰塵和腐蝕性氣體
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> | 1、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理 2、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù) |
實(shí)驗(yàn)原理 | 強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。 |
材料和試劑 | 細(xì)菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。 |
探頭型號大小 破碎細(xì)胞容量 | 2mm 150ul-5ml 3mm 200ul-10ml 6mm 10ml-50ml 10mm 50ml-150ml 13mm 50ml-250ml |
型號
VC 505
頻率
20KHz
功率
500W
密封變頻器型號
CV334(鋯鈦酸鉛晶體壓電變頻器)
標(biāo)配變幅桿
Φ13mm
標(biāo)配變幅桿長度
113mm
變幅桿整體尺寸
235 x 190 x 340 mm
變幅桿材質(zhì)
鈦合金Ti-6Al-4V
標(biāo)配變幅桿處理能力
50ml至250ml
可選變幅桿
Φ6mm,Φ10mm
變幅桿重量
900g
變幅桿電纜長度
1.8m
破碎容量
50ml至250ml
占空比
1-99%
功率調(diào)節(jié)范圍
連續(xù)可調(diào)(20-500w)
間隙時(shí)間
0.1-99.9s
溫度保護(hù)設(shè)定
有
功率振幅顯示
有
工作頻率范圍
能量監(jiān)視器數(shù)字式瓦特計(jì)自動(dòng)調(diào)諧自動(dòng)振幅補(bǔ)償
工作時(shí)間
基于微處理器的-可編程的10小時(shí)計(jì)時(shí)器1 - 59秒獨(dú)立于/關(guān)閉脈沖
超聲時(shí)間
從1秒到10小時(shí)
工作模式
間隙/連續(xù)
電源
220/110V 50Hz/60Hz或除非有其他要求,否則電要求以117V、50/60Hz發(fā)送
凈重
6.8kg
主機(jī)+換能器重量
9.6g
超聲波發(fā)生器 | 一臺 |
隔音箱 | 選購 |
工具箱 | 第88 - 00041轉(zhuǎn)換器和一個(gè)紅色的扳手 |
工具箱 | 第88 - 00026和一個(gè)藍(lán)色扳手 |
電源線 | 一根 |
專用破碎杯 | 選購 |
使用說明書 | 一份 |
備注說明 | 除非另有要求,運(yùn)輸完成并準(zhǔn)備使用帶有可更換的1/2“(13 mm)探頭,**工具包和使用手冊。**處理含有機(jī)溶劑或低表面張力液體的樣品時(shí),請勿使用具有可更換的探頭。使用固體探頭零件號630-0219。除非另有要求,所提供的探頭將具有可更換的。 |
謹(jǐn)慎 | 所有的探測器,包括那些有可替換的的探測器,都能在20khz共振。如果可替換的提示被刪除或刪除與探測器的其余部分分離,這個(gè)元素將不再共振20千赫,而電源將進(jìn)入一個(gè)過載條件,關(guān)閉或失敗。有機(jī)溶劑(如。和低表面張力液體穿透探測器和可更換的之間的接口,從而將微粒帶進(jìn)螺紋部分并將從探針中分離出來。當(dāng)處理含有有機(jī)溶劑或低表面張力的樣品時(shí)液體,總是使用固體探測器或作為一個(gè)備用的全波10(254毫米)探測器或擴(kuò)展器。 |
細(xì)胞破碎的方法:
一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、破碎細(xì)胞的較理想的方法。
3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml。(在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項(xiàng):
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時(shí),探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應(yīng)超過10秒;
3.使用前準(zhǔn)備好冰盒,樣品處理時(shí)必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。