293T，HEK-293T，人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞簡介

人胚腎細(xì)胞株293插入SV40 T-抗原基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。該細(xì)胞最初的名字293tsA1609neo，攜帶SV40復(fù)制序列，被廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因表達(dá)和蛋白表達(dá)。

運(yùn)輸和保存

1．1 mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收貨后-80℃冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇。若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)揮發(fā)干凈、凍存管蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2．T25瓶培養(yǎng)的細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1．293T貼壁能力較弱，加液、換液、洗滌時(shí)，須動(dòng)作輕柔，避免用液體直沖細(xì)胞，會(huì)造成細(xì)胞脫落。細(xì)胞生長不能過密，過密細(xì)胞容易脫落，脫落下來的細(xì)胞可以通過離心收集，消化后繼續(xù)培養(yǎng)。

2．293T細(xì)胞狀態(tài)直接影響病毒包裝效率。當(dāng)細(xì)胞傳代次數(shù)過多、細(xì)胞增殖速度減緩、細(xì)胞貼壁能力非常弱（輕柔換液也能導(dǎo)致細(xì)胞半數(shù)脫落）時(shí)，說明細(xì)胞狀態(tài)不好，會(huì)大幅降低病毒包裝效率。

3．使用高糖DMEM培養(yǎng)293T，低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培養(yǎng)基可能影響293T細(xì)胞的生長狀態(tài)。

4．如果發(fā)生293T細(xì)胞不貼壁，漂浮在培養(yǎng)基中的現(xiàn)象，請(qǐng)確認(rèn)所使用的DMEM中 NaHCO?濃度及培養(yǎng)箱中CO₂濃度。并參考以下培養(yǎng)體系：

① DMEM由1.5 g/L NaHCO? 配制而成，使用5% CO₂培養(yǎng)箱。

② DMEM由3.7 g/L NaHCO?配制而成，使用10% CO₂培養(yǎng)箱。

當(dāng)使用 NaHCO?含量高的培養(yǎng)基時(shí)，必須將這些細(xì)胞在10% CO₂中孵育，以便正確緩沖培養(yǎng)基。當(dāng)培養(yǎng)基沒有適當(dāng)緩沖時(shí)，293T細(xì)胞雖然可以存活，但將無法粘附并保持漂浮在培養(yǎng)基中。

5．培養(yǎng)時(shí)可酌情使用預(yù)鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿，若細(xì)胞狀態(tài)好，可省略此步驟。

6．本細(xì)胞僅用于科學(xué)研究，不得用于臨床治療。

7．請(qǐng)注意無菌操作，避免污染。

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