預(yù)期用途
此色譜層析條可用于人血清中NS1的定性檢測(cè)。它可以在IgG和IgM抗體出現(xiàn)之前對(duì)人血清中的登革熱病毒進(jìn)行早期診斷,僅用于研究
實(shí)驗(yàn)原理
登革熱NS1快速檢測(cè)是基于人血清中NS1抗原檢測(cè)的免疫試驗(yàn)。試驗(yàn)區(qū)纖維膜上包被有NS1特異性抗體,還設(shè)置了獨(dú)立的質(zhì)控區(qū),以確保試驗(yàn)的有效性。試驗(yàn)中,將樣本直接加至樣本加樣區(qū),然后將其放置在含有3滴緩沖液的貯存孔內(nèi),樣本與緩沖液混合,然后與膠體金結(jié)合的NS1特異性單抗反應(yīng),液體在纖維膜上移動(dòng))(毛細(xì)血管的作用),與纖維膜上包被的抗NS1抗體反應(yīng),如果樣本中存在抗原,試驗(yàn)區(qū)就會(huì)出現(xiàn)紅色條帶,如果試驗(yàn)操作正確,質(zhì)控區(qū)也會(huì)出現(xiàn)紅色條帶,則表示試驗(yàn)有效
整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程大約30min
試劑盒組成
1. 快速檢測(cè)條:25人份
2. Chase緩沖液,1瓶,6ml,室溫貯存
3. 64個(gè)貯存微孔
實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
1. 移液器和槍頭,5-50ul
樣本采集與準(zhǔn)備
1. 此試驗(yàn)只能使用人血清,由于試劑未得到優(yōu)化,所以不能直接用于全血或血漿的檢測(cè)
2. 從紅細(xì)胞凝塊中提取出血清,不能使用溶血
3. 樣品采集后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),不要將血清長(zhǎng)時(shí)間放置在室溫下
4. 采取靜脈穿刺采血,樣品在2-8℃下可保存7天,-20℃或更低溫度可保存30天,想要保存更長(zhǎng)時(shí)間,應(yīng)貯存在-70℃,避免反復(fù)凍融
5. 使用前應(yīng)將凍存的樣品在室溫下溶解
6. 如果血清是需運(yùn)輸?shù)?,則需根據(jù)聯(lián)邦感染試劑運(yùn)輸法規(guī)進(jìn)行包裝運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,將快速檢測(cè)條和試驗(yàn)樣本平衡至室溫,確保無(wú)物理?yè)p壞(如纖維膜刮傷,襯墊撕裂等),試驗(yàn)中可以采用類似于酶免96孔板的貯存微孔,不能重復(fù)使用樣本貯存孔
1. 加3滴(大約120ul)Chase緩沖液至微孔中
2. 樣本底板上(sample pad )加50ul的試驗(yàn)樣本,樣本底板位置在箭頭的之間,見下圖。不要將樣本加至緩沖液底板(buffer pad )
3. 立即將快速檢測(cè)條放入貯存微孔內(nèi),確保樣本側(cè)向下朝微孔方向,如果20秒內(nèi)未出現(xiàn)紅色條帶,輕輕拍打樣本底板以上的箭頭部位,使樣本和酶聯(lián)物移動(dòng)
4. 30min后立即讀取結(jié)果,超過(guò)了45min則會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果
結(jié)果說(shuō)明
陽(yáng)性結(jié)果:當(dāng)質(zhì)控區(qū)和樣本區(qū)都出現(xiàn)了紅色條帶時(shí)則判斷為陽(yáng)性,條帶模糊也判定為陽(yáng)性
陰性結(jié)果:只有質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)了紅色條帶,試驗(yàn)區(qū)并沒有時(shí)則認(rèn)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性
試驗(yàn)無(wú)效:質(zhì)控區(qū)無(wú)紅色條帶出現(xiàn)則試驗(yàn)無(wú)效,如果質(zhì)控線沒有但試驗(yàn)區(qū)出現(xiàn)紅色條帶則試驗(yàn)也為無(wú)效,檢驗(yàn)重新采樣檢測(cè)