Hamilton漢密爾頓哈美頓PRP-3/300液相色譜柱蛋白質(zhì)和肽純化分離分析半制備保護柱
▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱的詳細(xì)描述:
1. pH值在1~13范圍內(nèi)穩(wěn)定。
2. 比硅膠基色譜柱有更好的樣品采收效果(沒有硅烷醇基團)
3. 優(yōu)良的耐溶劑性能(載體能用強堿清洗以去除剩余的殘渣)
4. 2種粒徑: 10和12~22μm
5. 8種柱子內(nèi)徑:1~50.8 ㎜
6. 2種柱材料:316不銹鋼和PEEK
7. 分析柱和半制備/制備保護柱
Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱是聚合物基質(zhì)反相高效液相色譜柱,用于蛋白質(zhì)和肽的純化和分離,具有優(yōu)秀的回收率(> 90%)。它是基于PRP-1的基礎(chǔ)上采用了300孔徑,而PRP-1采用的是100?的孔 徑。PRP-3色譜柱采用300孔徑,不會導(dǎo)致不可逆的蛋白質(zhì)吸附,提高了蛋白質(zhì)回收率。 高穩(wěn)定性的聚合物填料(苯乙烯 - 二乙烯基苯)因為不含硅烷醇基,不會導(dǎo)致不可逆的蛋白質(zhì)吸附,從而提高了蛋白質(zhì)的回收率。
以PS-DVB為載體,耐壓5,000psi,在流動相發(fā)生改變的情況下載體也不會出現(xiàn)收縮或溶脹現(xiàn)象。與小分子化合物不同,大部分的蛋白質(zhì)內(nèi)部為疏水性,外側(cè)帶高電荷,特 別是當(dāng)pH值接近蛋白質(zhì)的等電點時,經(jīng)常會出現(xiàn)溶解問題。性能穩(wěn)定,使用者在蛋白組學(xué)研究中可以選擇更廣泛的溶劑,如濃酸、腐蝕性的變性劑和清洗液等。
▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱固定相結(jié)構(gòu)和應(yīng)用:
應(yīng)用:
有機化合物:大分子(> 2,000mw)、肽、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)水解物、 保護和去保護的寡核苷酸、核酸。
▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱的訂購信息:
外形尺寸 粒徑 貨號
10 μm 12–20 μm
2.1 x 150mm 79392
4.1 x 150mm 79466
4.6 x 150mm PEEK 79382
4.6 x 250mm PEEK 79574
7.0 x 305mm 79468
10 x 250mm 79526
21.2 x 250mm 79147
21.2 x 100mm 79186
21.2 x 250mm 79469
散裝樹脂(1 g)79701 79702
孔徑:300
材料:PS-DVB
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在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,缺點是目前實 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱.