美國Thermo NanoDrop ND-2000
一、產(chǎn)品應(yīng)用
ND-2000是目前國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室中使用為廣泛的一款微量分光光度計(jì)，其*的性能、準(zhǔn)確的結(jié)果贏得了廣大用戶的好評。
該產(chǎn)品可用于以下幾個方面：
* 紫外檢測：常規(guī)紫外光波長下檢測樣品吸光值；
* 核酸檢測：可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值；
* 探針檢測：檢測熒光標(biāo)記探針的吸光值，可用于去除未能標(biāo)記探針的樣品；
* 細(xì)胞培養(yǎng)物檢測：檢測細(xì)胞培養(yǎng)物在600nm處的吸光值；
* 蛋白檢測：檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值；
* 蛋白標(biāo)記檢測：可檢測被BCA、Bradford或Lowry標(biāo)定的蛋白樣品，自動畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算出待測蛋白質(zhì)濃度。
二、 產(chǎn)品簡介
NanoDrop 2000超微量分光光度計(jì)是NanoDrop的產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要 0.5~2ul，在檢測臺上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細(xì)管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點(diǎn)。此產(chǎn)品設(shè)計(jì)受保護(hù)，并在*廣受歡迎，其準(zhǔn)確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進(jìn)行各項(xiàng)研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光譜檢測，且不需要暖機(jī)，開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測器，檢測吸收值可高達(dá)300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。
待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻?yàn)榧?，若無vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保 2ul 具有代表性。
檢測時選擇不同檢測模式，可以得到快速的結(jié)果：
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計(jì)算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square，待測蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請?jiān)旈喸噭┱f明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，在佳時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個標(biāo)準(zhǔn)曲線多可有七個標(biāo)準(zhǔn)品，每個標(biāo)準(zhǔn)品多可做五重復(fù)。
* 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用 2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙（編號： 34155 ）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
NanoDrop 2000超微量分光光度計(jì)是NanoDrop的產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要 0.5~2ul，在檢測臺上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細(xì)管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點(diǎn)。此產(chǎn)品設(shè)計(jì)受保護(hù)，并在*廣受歡迎，其準(zhǔn)確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進(jìn)行各項(xiàng)研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光譜檢測，且不需要暖機(jī)，開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測器，檢測吸收值可高達(dá)300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。
待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻?yàn)榧?，若無vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保 2ul 具有代表性。
檢測時選擇不同檢測模式，可以得到快速的結(jié)果：
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計(jì)算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square，待測蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請?jiān)旈喸噭┱f明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，在佳時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個標(biāo)準(zhǔn)曲線多可有七個標(biāo)準(zhǔn)品，每個標(biāo)準(zhǔn)品多可做五重復(fù)。
* 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用 2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙（編號： 34155 ）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
濃度范圍：
| 樣品種類 | 低濃度 | 高濃度 （超過時請稀釋樣品） | 再現(xiàn)性 （五重復(fù)以上） |
| 核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul （dsDNA） 12000 ng/ul （RNA） | 濃度范圍在 2-100 ng/ul 時，SD為 ± 2 ng/ul 濃度范圍大于 100 ng/ul 時，CV為 ± 2% |
| 純BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 濃度范圍在 0.05-10 mg/ml 時，SD為 ± 0.10 mg/ml 濃度大于 10 mg/ml 時，CV為 ± 2% |
| 蛋白質(zhì)，以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV：± 2% （在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然） |
| 蛋白質(zhì)，以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV：± 2% （在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然） |
| 蛋白質(zhì)，以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 濃度范圍在 100-500 ug/ml 時，SD為 ± 25 ug/ml 濃度大于 500 ug/ml 時，CV為 ± 5% |
| 蛋白質(zhì)，以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 濃度范圍在 15-50 ug/ml 時，SD為 ± 4 ug/ml 濃度大于 50 ug/ml 時，CV為 ± 5% |
三、技術(shù)參數(shù)：
小樣品體系 0.5 μl
樣品數(shù)量 1
光路徑 1 mm （自動調(diào)整到0.05 mm）
光源 氙閃燈
檢測器 2048 CCD陣列
波長范圍 190 -840 nm
波長準(zhǔn)確度 1nm
光譜分辨率 < 1.8 nm （FWHM at Hg 253.7 nm）
光吸收精度 0.002 （1 mm光路徑）
光吸收準(zhǔn)確度 2% （at 0.76 at 257 nm）
光吸收范圍 0.02至300 （10 mm光路徑）
檢測下限 2 ng/μl （dsDNA）
檢測上限 15,000 ng/μl （dsDNA）
檢測時間 < 5秒
尺寸 14 x 20 cm
重量 2.0 kg
樣品基座材料 303科研不銹鋼和石英光纖
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