Biotium GelRed和Gelgreen核酸凝膠染料現(xiàn)貨 GelRed 和GelGreen是設(shè)計(jì)以取代劇毒的代替高毒性的溴化乙錠(EtBr)的新一代核酸凝膠熒光染料。Biotium科學(xué)家研發(fā)的GelRed 和GelGreen集低毒性、高靈敏性和出色的穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)于一體,效果由于EtBr及其他EtBr替代品。
幾十年來,EtBr因極其低廉的價(jià)格,一般的靈敏度,一直被用作核酸凝膠染色的主要染料。然而EtBr是一個(gè)高度誘變的物質(zhì)。該染料的使用安全隱患,凈化及廢物處置的相關(guān)費(fèi)用等,導(dǎo)致其代價(jià)高昂。正因如此,近年來市場(chǎng)上出現(xiàn)了一些替代品,如SYBR系列染料等。盡管這些替代染料減少了致突變性,但卻喪失了染料其他方面的功能。例如,SYBR Safe的靈敏度很低,SYBR Green及SYBR Gold的穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于EtBr。SYBR染料能快速的進(jìn)入細(xì)胞,結(jié)合線粒體及細(xì)胞核DNA,是的染料在一定濃度是有毒的。事實(shí)上,在紫外線或其他誘變劑誘導(dǎo)下,SYBR Green I 強(qiáng)烈的突變性已經(jīng)被廣泛認(rèn)知。(Ohta,et al.Mut Res 492,91(2001))
為了保證GelRed和GelGreen的安全性,Biotium的科學(xué)家采用一種新型非常簡(jiǎn)單的概念:阻止染料進(jìn)入活細(xì)胞減少遺傳毒性。我們相信,不給DNA結(jié)合染料滲透活細(xì)胞中結(jié)合基因組DNA的機(jī)會(huì),便可以保證染料沒有或大幅度減少其誘變性作用。因此,我們?cè)O(shè)計(jì)的GelRed和GelGreen 染料擁有*化學(xué)結(jié)構(gòu)保證其無法滲透細(xì)胞膜。Ames試驗(yàn)驗(yàn)證即使?jié)舛冗h(yuǎn)遠(yuǎn)高于實(shí)驗(yàn)者操作凝膠染色的工作濃度,GelRed和GelGreen也無誘變性。此外,環(huán)境的安全性試驗(yàn)表示,GelRed和GelGreen是*無害的,對(duì)水生生物無毒。因此,廢棄的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道,或按照普通垃圾處理。
無論是作為預(yù)制凝膠染料染色或電泳后染色,GelRed和GelGreen染料都是搞靈敏度的。312/302nm的紫外光透射下,GelRed靈敏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過EtBr,與SYBR Gold靈敏度相當(dāng),后凝膠染色法GelRed效果更明亮。與SYBR Gold不同的是,GelRed 也可以被作高度靈敏的與之驚叫預(yù)制凝膠染色。GelGreen是用于488nm激光凝膠掃描儀或者可見藍(lán)光激發(fā)的Dark Reader 的研究人員使用要求。GelGreen光譜類似于SYBR Safe,但比后者更為靈敏。
Biotium GelRed和Gelgreen核酸凝膠染料現(xiàn)貨 GelRed和GelGreen另一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)是其顯著的穩(wěn)定性??梢杂貌僮鱁tBr同樣的方式操作兩種染料。這意味著,染料在水中是非常穩(wěn)定的,可以在室溫下*儲(chǔ)存,也可以在微波中加熱進(jìn)行預(yù)制凝膠。這兩種燃料也非常耐光,暴露在室內(nèi)燈光下也比較穩(wěn)定。
EB GelRed SYBR Safe GelGreen
圖1. GelRed 和GelGreen比EB和SYBR Safe更靈敏。左圖:比較了GelRed 和EB 的1%預(yù)制膠,TBE緩沖液跑膠。右圖:比較了GelGreen和SYBR Safe 1%瓊脂糖凝膠的后染狀況,同樣在TBE緩沖液中完成。選用了Invitrogen的1 Kb的DNA Ladder作2倍稀釋,分別加入四個(gè)泳道中,從左向右依次為200ng,100ng,50ng和25ng。
圖2. 在37°C下,分別使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 對(duì)HeLa 細(xì)胞進(jìn)行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實(shí)驗(yàn)顯示SYBR染料迅速進(jìn)入細(xì)胞并將細(xì)胞內(nèi)的核酸染成亮綠色(以上僅圖示 SYBR Green 1),而 GelRed 和 GelGreen 則因?yàn)椴荒艽┩讣?xì)胞膜而*沒有進(jìn)入細(xì)胞內(nèi), 足以證明GelRed和GelGreen是安全的。
圖 3. GelGreen (綠色) GelRed (紅色)在 PBS 緩沖溶液中結(jié)合 dsDNA 后的激發(fā)和發(fā)射光譜。
圖 4. 室溫下, GelRed ( 500 nm )和 SYBR Gold ( 488 nm )稀釋在 1 × TBE 凝膠染色液中測(cè)得的吸光度隨時(shí)間變化圖。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分別為 0.029 和 0.051 。
GelRed和Gelgreen核酸凝膠染料特點(diǎn):
比EtBr安全:
艾姆斯氏實(shí)驗(yàn)以及其他實(shí)驗(yàn)證實(shí)無誘變性無細(xì)胞毒性;
方便處理:
通過了環(huán)境安全實(shí)驗(yàn),可以直接丟棄無需特殊處理。
超高的靈敏度:
比EtBr和SYBR Safe更靈敏。
*的穩(wěn)定性:
溶于水中,室溫下能*保存,微波爐加熱性能穩(wěn)定。
廣泛的適用性:
適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色。
簡(jiǎn)單的步驟:
預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色。
兼容標(biāo)準(zhǔn)紫外凝膠成像系統(tǒng)及可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置:
使用312nm激發(fā)的UV凝膠成像系統(tǒng)時(shí),GelRed可以替代EB;無需改變成像條件;GelRed 可用EB常用儀器觀察;GelGreen可用SYBR染料儀器進(jìn)行觀察。GelRed 可以替代 EB ; GelGreen 足以替代任意一種 SYBR 染料。
可用于下游實(shí)驗(yàn):
普通的膠回收后,可用于下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品信息:
Cat# | Product Name | Unit Size | 品 牌 |
41001 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water | 4.0 L | Biotium |
41002 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
41003 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5 mL | Biotium |
41003-1 | GelRedTM 10,000X solution in water, bulk pack | 10 mL | Biotium |
41004 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
41005 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5mL | Biotium |