口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
使用說明書
產(chǎn)品名稱
通用名：口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus Asia Ⅰ（ELISA）
貨號：E310305
包裝規(guī)格 96T×1/盒(注：酶標(biāo)板不可拆)、96T×2/盒（注：酶標(biāo)板一塊可拆、一塊不可拆）
預(yù)期用途
用于檢測牛、羊、豬血清中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，可用于口蹄疫亞洲Ⅰ型疫苗免疫效果評價(jià)。
原 理
系由預(yù)包被口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體的酶標(biāo)板、抗體工作液、抗原液酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用阻斷酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測牛、羊、豬血清樣本中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)將稀釋的樣本與抗原液同時(shí)加入酶標(biāo)板中孵育，樣本中的抗體與酶標(biāo)板上的抗體競爭抗原，阻斷抗原與板的結(jié)合；經(jīng)洗滌后，再加抗體工作液孵育；經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)記物孵育；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負(fù)相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體。
試劑盒組成
序號 | 名稱 | 規(guī)格（96T×1） | 規(guī)格（96T×2） |
1. | 酶標(biāo)板 | 1 | 2 |
2. | 酶標(biāo)記物 (紅蓋) | 1 | 1 |
3. | 抗體工作液 (藍(lán)蓋) | 1 | 1 |
4. | 抗原液 (黑蓋) | 1 | 1 |
5. | 洗滌液 | 1 | 2 |
6. | 底物液A (白蓋) | 1 | 1 |
7. | 底物液B (黑蓋) | 1 | 1 |
8. | 終止液 (黃蓋) | 1 | 1 |
9. | 陽性對照 (紅蓋) | 1 | 1 |
10. | 陰性對照 (綠蓋) | 1 | 1 |
11. | 蓋板膜 | 1張 | 2張 |
12. | 自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
13. | 說明書 | 1份 | 1份 |
儲存及有效期 于2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
適用儀器 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。
樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，*需置-20℃保存。
2.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
3.用已稀釋的洗滌液將待檢血清按64倍稀釋（如5μl血清加入315μl洗滌液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
參考值 實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對照A值≥1.0，陽性對照A值≤50%×陰性對照A值。
檢驗(yàn)結(jié)果的解釋
1.PI（阻斷率）=（1-樣本A值/陰性對照孔平均A值）×*，PI≥50%為陽性；PI＜50%為陰性。
2.本實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果為陽性時(shí)表明待檢樣本中含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，且效價(jià)高于1:128，達(dá)到保護(hù)水平。
3.本實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果為陰性時(shí)表明待檢樣本中不含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，或效價(jià)低于1:128，未達(dá)到充足保護(hù)水平。
4.如需了解樣本抗體的zui終效價(jià)，可將樣本進(jìn)行梯度稀釋，使PI≥50%的zui高稀釋比例即為該樣本抗體的zui終效價(jià)。
試驗(yàn)方法的局限性
僅作為定性牛、羊、豬血清中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，根據(jù)PI值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估。
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