地塞米松檢測試劑盒
(酶聯(lián)免疫法)
1 原理及用途
地塞米松檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的地塞米松(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的地塞米松藥物和酶標板上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗地塞米松藥物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含地塞米松藥物含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中地塞米松藥物的殘留量。
2 技術指標
2.1 靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應模式:25℃,75min
2.3 檢測下限:
肌肉組織 0.2ppb,牛奶 0.5ppb,飼料 1ppb
3 組成
酶標板 96孔
標準液:6瓶
高標準液(紅蓋):1瓶
酶標記物(紅蓋)1瓶
抗體工作液(藍蓋)1瓶
底物液A(白蓋)1瓶
底物液B(黑蓋)1瓶
終止液(黃蓋)1瓶
濃縮洗滌液(白蓋1瓶
復溶液(黃蓋)1瓶
說明書 1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
4.3 試劑:乙酸乙酯、NaOH、正己烷
6 酶聯(lián)免疫試驗步驟
6.1 編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應:加標準品或樣本100µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光反應30分鐘。
6.3 洗 滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,zui后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
6.4 加酶反應:加酶標記物100µl/孔,25℃避光反應30分鐘。
6.5 洗 滌:同上
6.6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍色過淺,可適當延長反應時間)。
6.7 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應。
6.8 測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應在終止反應后10分鐘內(nèi)完成。
7 結(jié)果分析
7.2 標準曲線的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標,對應的標準液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標,繪制標準液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。(索?。?/span>
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。