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ELISA試劑盒操作步驟
ELISA試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí).
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果.
在450nm波長處測定各孔的OD值.
ELISA操作步驟
齊一生物免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)檢測試劑盒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)材料,試劑,溶液
1.酶標(biāo)板,100μltip頭,1mlEp管,濕盒
2.包被稀釋液(0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH9.6)
碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH9.6
3.封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗滌液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
5.樣本稀釋液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
齊一生物免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)檢測試劑盒6.酶標(biāo)第2抗體(羊抗兔)稀釋范圍1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-過氧化氫尿素溶液)人乳鐵傳遞蛋白乳鐵蛋白(LFLTF)檢測試劑盒
人可溶性血管細(xì)胞粘附因子1(sVCAM-1)檢測試劑盒
人可溶性粘附分子sCD26檢測試劑盒
人布魯氏桿菌igG檢測試劑盒
人單胺氧化酶A(MAOA)檢測試劑盒
人抗丙型肝炎抗體(抗-HCV)檢測試劑盒
人總膽固醇(TC)檢測試劑盒
人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)檢測試劑盒
人麻疹病毒IgM(MVIgM)檢測試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)檢測試劑盒
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(sTfR1)檢測試劑盒
人基質(zhì)裂解素2(ST-2)檢測試劑盒
人纖維介素蛋白(fgl2)檢測試劑盒
人埃滋蛋白(Ezrin)檢測試劑盒
人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)檢測試劑盒
人纖維連接蛋白(FN)檢測試劑盒
人單純皰疹病毒(HSV)檢測試劑盒
人胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒
人內(nèi)脂素內(nèi)臟脂肪素(visfatin)檢測試劑盒
人25羥基維生素D(25-OH-D)檢測試劑盒
人可替?。–otinine)檢測試劑盒
人凋亡相關(guān)因子(FASCD95)檢測試劑盒
人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)檢測試劑盒
人β干擾素(IFN-βIFNB)檢測試劑盒
人β2微球蛋白(BMGβ2-MG)檢測試劑盒
人凝血因子X(FX)檢測試劑盒
人凋亡抑制蛋白檢測試劑盒
人C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測試劑盒
人白介素23(IL-23)檢測試劑盒
人紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測試劑盒
人前降鈣素(PCT)檢測試劑盒
人副流感病毒(HPIV)抗原檢測試劑盒
人內(nèi)皮素1(ET-1)檢測試劑盒
人血管緊張素(Ang)檢測試劑盒
人17羥孕酮(17-OHP)檢測試劑盒
人前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒
人血管生成素1(ANG-1)檢測試劑盒