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產(chǎn)品名稱(chēng):LIF human 白血病抑制因子(人),Leukemia inhibitory factor,重組人白血病抑制因子
產(chǎn)品說(shuō)明:白血病抑制因子是一種多效的淋巴因子,屬于細(xì)胞因子中白細(xì)胞介素6家族。它zui初被描述為髓系白血病細(xì)胞增殖的抑制因子和髓系白血病細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)因子。LIF的其他活性包括抑制脂肪形成和在膽堿能神經(jīng)元的分化、造血作用、炎癥反應(yīng)、骨代謝有重要作用。LIF能抑制胚胎干細(xì)胞的分化,因此在ES細(xì)胞培養(yǎng)中有非常重要的作用。人和小鼠LIF在氨基酸水平上有78%同源性。人源的LIF對(duì)小鼠和人細(xì)胞具有相同的活性,但是鼠科動(dòng)物的LIF對(duì)人細(xì)胞不具有活性。
貨號(hào):01-A0880
批號(hào):01-1-88-8127
產(chǎn)品規(guī)格:10µg, 100µg, 1000µg
來(lái)源:ISOkine™重組人白血病抑制因子是來(lái)源于大麥胚乳細(xì)胞(Hordeum vulgare)。
形式:經(jīng)過(guò)0.2µm濾膜濾滅,從PBS中凍干,pH 7.2。
純度:經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳分析,純度大于98%。
溶解:注意: 打開(kāi)瓶蓋前先用離心機(jī)離心。建議在無(wú)菌水溶解凍干粉狀重組蛋白質(zhì),終濃度不小于100 µg/ml。長(zhǎng)期存儲(chǔ)建議添加一個(gè)載體蛋白(0.1% HSA或BSA)。
穩(wěn)定性:凍干粉蛋白質(zhì),雖然在室溫下能穩(wěn)定保存幾周,但儲(chǔ)存在-20°C。分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好并立即放于-20°C,或立即將重組蛋白放于-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
生物活性:每批ISOkine™生長(zhǎng)因子都進(jìn)行生物活性測(cè)試,并已證實(shí)與其他商業(yè)來(lái)源的生長(zhǎng)因子有類(lèi)似的生物活性,ISOkine™人LIF的生物活性是在一定劑量依賴下通過(guò)誘導(dǎo)TF-1細(xì)胞增殖的能力來(lái)決定的。對(duì)應(yīng)于比活性> 2.5 x 10 e6 U / mg來(lái)說(shuō),這種效應(yīng)的ED50值通常是低于0.4 ng / ml。對(duì)具體的應(yīng)用和細(xì)胞系應(yīng)確定*濃度。
內(nèi)毒素水平:ISOkine™系列產(chǎn)品內(nèi)毒素水平都低于0.005ng/µg (< 0.05EU/µg).
MAT分析:純化的ISOkine™系列產(chǎn)品不攜帶有致熱的或促炎污染物,因?yàn)橛萌?0-plex細(xì)胞因子結(jié)合單核細(xì)胞活化測(cè)試分析檢測(cè)IL-6, TNF-alpha 和IL-1beta的誘導(dǎo). Ref. The Blood Bank, University Hospital of Iceland, Reykjavik, Iceland。
分子量: 重組人LIF包含180個(gè)氨基酸和一個(gè)長(zhǎng)度為16個(gè)氨基酸的組氨酸標(biāo)簽,總氨基酸數(shù)為196個(gè)。預(yù)計(jì)分子量為21.8KDa。由于糖基化,重組蛋白在SDS-PAGE電泳下遷移顯示分子量大小為25-30 kDa。
白血病抑制因子(人)簡(jiǎn)介
1.LIF的產(chǎn)生
已在活化的T細(xì)胞、單核細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、肝成纖維細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、胸腺上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有LIF的表達(dá)。
2.LIF的分子結(jié)構(gòu)和基因
人的LIF基因定位于第22號(hào)染色體,基因長(zhǎng)度分別為6.0kb,含有3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子,基因編碼區(qū)域具有高度的保守序列。LIF為180個(gè)氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個(gè)糖基化位點(diǎn),6個(gè)Cys,分子內(nèi)部二硫鍵對(duì)于維持LIF分子的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)活性可能起重要作用。由于糖基化程度的不同,LIF分子量和電荷有所差別,分子量38~64kDa,IP8.6~9.2。LIF體外生物學(xué)功能似乎與糖基化程度無(wú)關(guān),但糖基化是否影響LIF在體內(nèi)穩(wěn)定性和功能尚待確定。在氨基酸水平上,LIF與抑瘤素-M(oncostatin M,OSM)和睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)有一事實(shí)上的同源性,而且在蛋白質(zhì)分子二級(jí)結(jié)構(gòu)上也有相似之處。
3.LIF的受體
ILF受體α鏈為低親和力受體,其結(jié)構(gòu)屬于紅細(xì)胞生成素受體家族成員,含有2個(gè)該家族特征性結(jié)構(gòu)域。gp130是LIF受體的另一個(gè)亞單位,與LIF受體α鏈共同組成高親和力受體。LIF受體分布較廣泛,如脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、胚胎癌細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、M1白血病細(xì)胞以及活化的巨噬細(xì)胞等。
4.LIF的生物學(xué)活性
(1)調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和表型:LIF抑制小鼠胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell,ES)的分化。對(duì)于造血系統(tǒng)中的腫瘤細(xì)胞,LIF常顯示出抑制效應(yīng),同時(shí)誘導(dǎo)這些腫瘤細(xì)胞的分化,例如LIF可抑制小鼠白血病M1細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞表型,如表達(dá)Fc受體,并獲得吞噬能力等。對(duì)單核細(xì)胞的分化也超誘導(dǎo)作用。LIF與GM-CSF、G-CSF或IL-6協(xié)同抑制HL-60和U937細(xì)胞的生長(zhǎng),并誘導(dǎo)其分化。LIF增強(qiáng)IL-3對(duì)巨核細(xì)胞前體的造血干細(xì)胞的致有絲分裂作用,提高體內(nèi)巨核細(xì)胞和血小板的數(shù)量。LIF還可促進(jìn)成肌細(xì)胞的增殖。在一定條件下,LIF可促進(jìn)新生大鼠背根神經(jīng)節(jié)中的神經(jīng)元表型從腎上腺素能型轉(zhuǎn)變?yōu)槟憠A能型,因此LIF又稱(chēng)為膽堿能神經(jīng)元分化因子(cholinergic neuronal differentia-tion factor,CNF)。此外,LIF還可促進(jìn)移植神經(jīng)嵴分化的胚胎性神經(jīng)元的存活。
(2)抑制脂蛋白脂酶活性,降低3T3-L1脂肪細(xì)胞對(duì)游離脂肪酸的攝取。
(3)促進(jìn)骨的重吸收,這種作用可能是通過(guò)LIF刺激成骨細(xì)胞合成前列腺素所介導(dǎo)的。
(4)誘導(dǎo)肝臟急性期蛋白的產(chǎn)生。
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