實驗技術—細胞培養(yǎng)板的選擇
細胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細胞的一種常用和重要的工具,形狀、規(guī)格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱?你對如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑?對不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會?請看丁香園資深站友總結的「細胞培養(yǎng)板的選擇」。
細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定。
平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用,但當細胞數(shù)目較少,如做克隆時,就用96孔平底板;另外,做MTT等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致,還便于MTT檢測。
至于U或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面,當做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要U型板,因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內(nèi)。V型板的用途更少,一般用于細胞殺傷實驗時,為了使效靶細胞緊密接觸,常使用V型板,但這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底還可以拿來做分析、化學反應、同位素摻入的實驗或是保存樣品用。
孔數(shù)的選擇
流式一般用6孔,MTT一般用96孔,細胞爬片一般用24孔等,要具體根據(jù)你的實驗來定。
細胞培養(yǎng)板主要材料是treatedsufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還與浮游細胞的生長材料,降低結合表面積有關,取決于實驗材料上的應用與對材料的選擇。
細胞培養(yǎng)板與酶標板的區(qū)別
用多孔細胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以,可以用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。
區(qū)別:酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
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