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單組分 TMB 顯色液
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
QYE-910 | 單組分 TMB | 100ml |
QYE-950 | 單組分 TMB | 500ml |
保存:2-8℃,請(qǐng)勿冷凍。
穩(wěn)定性:2-8℃條件下,大于 18 個(gè)月。敏感性:高于AB 雙液。
組成:TMB,穩(wěn)定劑。
產(chǎn)品外觀:?jiǎn)谓M分 TMB 過(guò)氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍(lán)色或者是淡綠色。底物溶液 37℃ 溫浴 15 分鐘后,在 650nm 時(shí)檢測(cè)OD 值小于 0.04。
產(chǎn)品說(shuō)明:
TMB 因其靈敏度較高及無(wú)致癌性而得到廣泛應(yīng)用。單組分 TMB 過(guò)氧化物酶底物與辣根過(guò)氧化物酶連接物反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種深藍(lán)色的產(chǎn)物,適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中。又分 可溶型和沉淀型。
可溶型 | 沉淀型 |
可溶性藍(lán)褐色產(chǎn)物 | 沉淀性藍(lán)褐色產(chǎn)物 |
適用于 ELISA及其他通過(guò)液體反應(yīng)檢測(cè)HRP 的應(yīng)用 | 適用于Western Blot 及其免疫沉淀化學(xué)等等 |
一步即用型溶液,無(wú)需混合,方便快捷 |
使用方法
使用之前,以超純水反復(fù)洗滌的適當(dāng)容器, 倒出適量單組分TMB 底物溶液,即可使用。
加液:加完 HRP 結(jié)合物并溫育一定時(shí)間后, 洗板 3-5 次,每孔加 TMB 底物 100- 150uL, 37°C 溫育 5-30 分鐘。
終止(備選):加等體積的 1N 的 HCl 或者 2N 的 H2SO4 來(lái)終止反應(yīng)。酶標(biāo)孔中反應(yīng)液從藍(lán)色變?yōu)辄S色。
讀數(shù):終止反應(yīng)后,30 分鐘內(nèi)在 450nm 處讀數(shù)。不加終止液,顯色更加穩(wěn)定,可以在 620-650nm處讀數(shù),
注意:
降低底物強(qiáng)度:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀,表明 TMB 底物反應(yīng)過(guò)于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可以在加入終止液后馬上讀數(shù);另外,可以進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP 結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色,推薦進(jìn)一步降低一抗和/或 HRP 結(jié)合物的濃度,盡量避免降低底物濃度。動(dòng)力學(xué)檢測(cè):TMB 單組分底物在與過(guò)氧化物酶反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種藍(lán)色,可以在加底物后 620-650nm 處讀數(shù), 不需終止反應(yīng)。
免責(zé)聲明