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液相色譜-超高分辨質(zhì)譜助力重組AAV的序列覆蓋度和 分子量分析
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賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司
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重組腺病毒（rAAV）是一種廣泛使用的基因治療載體，目前共13種血清類(lèi)型被鑒定。AAV衣殼由60個(gè)拷貝的三種蛋白亞基組成，分別是VP1（大約80 kDa）、VP2（大約70 kDa）和VP3（大約60 kDa）[1]。其中，VP2包含VP3的全部序列，VP1包含VP2的全部序列[2]。理論上VP1:VP2:VP3的質(zhì)量比例為1:1:10。由于三種亞基的序列相似但相對(duì)豐度相差較大，三種亞基在常規(guī)分離中容易共洗脫，導(dǎo)致VP1和VP2的信號(hào)無(wú)法正常解析。在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中，有些AAV樣品中VP1的含量極少，與VP3的比例甚至低于1:1000，導(dǎo)致VP1信號(hào)難以檢測(cè)。