萊姆病毒IgM抗體檢測(cè)試劑盒（ELISA） 返回列表頁(yè)

   萊姆病(Lyme disease)是由伯氏疏螺旋體(Bolrelia burgdorferi)引起的一種慢性自然疫源性疾病，因在1977年ZUI先發(fā)現(xiàn)于美國(guó)康涅狄克州的萊姆鎮(zhèn)(Lyme town)而得名 。

    萊姆病是一種由蜱傳播的疾病，主要在北半球的溫帶地區(qū)流行。萊姆病的癥狀包括皮膚紅斑、發(fā)熱、疲勞等，如果不及時(shí)治療，可能會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)系統(tǒng)病變等嚴(yán)重后果。為了預(yù)防和治療萊姆病，我們需要了解萊姆病的傳播途徑和癥狀，采取有效措施。本文將為您介紹萊姆病的相關(guān)知識(shí)，幫助您更好地了解和預(yù)防萊姆病。

    萊姆病主要通過(guò)蜱叮咬傳播，感染者的血液中含有萊姆病螺旋體，被蜱叮咬后，螺旋體會(huì)進(jìn)入蜱體內(nèi)，再通過(guò)蜱叮咬傳播給其他人。預(yù)防萊姆病的最佳方法是避免被蜱叮咬。在蜱的活動(dòng)地區(qū)，應(yīng)穿長(zhǎng)袖衣服和長(zhǎng)褲，并使用防蜱液保護(hù)皮膚。在戶外活動(dòng)后，應(yīng)及時(shí)檢查身體，特別是頭發(fā)、腋下、腰部、腿部等容易被蜱叮咬的部位。如果發(fā)現(xiàn)蜱，則應(yīng)及時(shí)用鑷子等工具將其取出，并清洗和消毒叮咬部位。

    萊姆病的早期癥狀包括皮膚紅斑、發(fā)熱、疲勞等，這些癥狀通常在感染后1-4周內(nèi)出現(xiàn)。如果不及時(shí)治療，萊姆病可能會(huì)進(jìn)展為關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)系統(tǒng)病變等嚴(yán)重后果。如果您在蜱的活動(dòng)地區(qū)被蜱叮咬后出現(xiàn)這些癥狀，應(yīng)立即就醫(yī)。

    治療萊姆病的方法包括使用抗生素和充分休息。早期治療可以避免疾病進(jìn)展和后遺癥的產(chǎn)生。在治療過(guò)程中，還應(yīng)避免大量飲酒和吸煙等不良習(xí)慣，以免影響療效。

    總之，預(yù)防和及時(shí)治療萊姆病非常重要。通過(guò)避免被蜱叮咬、使用防蜱液等措施，我們可以有效地預(yù)防萊姆病。如果您已經(jīng)感染了萊姆病，及時(shí)就醫(yī)治療是非常必要的。讓我們一起關(guān)注萊姆病，保護(hù)自己和他人的健康！

萊姆病抗體IgM檢測(cè)試劑盒

1、用途: 本試劑盒用于定性/定量檢測(cè)血清或血漿中抗萊姆氏IgG抗體, 可以檢測(cè)所有萊姆氏螺旋菌亞型的感染。

2、簡(jiǎn)介: 萊姆病是一種蟬傳螺旋體感染性疾病。萊姆病的病原體為萊姆病螺旋體，能引起人類慢性游走性紅斑，以及心臟、神經(jīng)和關(guān)節(jié)等多系統(tǒng)受累的疾病，對(duì)人群健康危害較嚴(yán)重。萊姆病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要是血清學(xué)方法。本試劑盒采用特異性萊姆氏螺旋菌三個(gè)亞型的混合抗原進(jìn)行微孔板包被,具有較高的檢測(cè)靈敏度和特異性。

3、檢測(cè)原理：采用夾心ELISA方法，將萊姆氏螺旋菌抗原包被于微孔板底部，檢測(cè)時(shí)，稀釋樣本及試劑盒質(zhì)控品加入微孔板，樣本中的抗萊姆氏螺旋菌IgG抗體與抗原結(jié)合，經(jīng)過(guò)孵育，洗滌，加入HRP標(biāo)記的抗人IgG二抗，在經(jīng)過(guò)孵育，洗滌后加入HRP酶的底物顯色劑TMB，終止顯色，酶標(biāo)儀讀板，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或者Cutoff值判斷樣本的陰陽(yáng)性。

4、注意事項(xiàng)和預(yù)防措施

1）       此試劑盒僅用于體外診斷和專業(yè)人士使用。

2）       在檢測(cè)開始之前，仔細(xì)和完整的閱讀說(shuō)明書，使用試劑盒提供的包裝插件的有效版本，    確保所有的程序都清楚。

3）       檢測(cè)時(shí)請(qǐng)不要使用已被損害的試劑，以確保自身安全。

4）       按照批號(hào)和有效期，不混合使用不同批號(hào)的試劑，也不要使用過(guò)期的試劑。

5）       遵守好的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則和安全指南。穿實(shí)驗(yàn)服，帶橡皮手套，有必要時(shí)請(qǐng)戴護(hù)目鏡。

6）       此試劑盒中含有會(huì)傷害眼睛和皮膚的有害試劑。請(qǐng)閱讀材料來(lái)源和標(biāo)簽獲取詳細(xì)信息。

7）       根據(jù)國(guó)家生物有害物質(zhì)及安全條例，所有化學(xué)藥品和準(zhǔn)備或使用過(guò)的試劑都應(yīng)當(dāng)做有害物質(zhì)進(jìn)行處理。

8）       避免接觸終止液，以免刺激或著燒皮膚。

9）       試劑盒中的所有試劑（包括檢測(cè)過(guò)的人血清/血漿）對(duì)HIV/II,HbsAg和HCV都表現(xiàn)為陰性,但是試劑中會(huì)出現(xiàn)此類病毒（HIV/II,HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原體的可能性都不能wanquan被排除.因此,所有的試劑在使用和處理的過(guò)程中都應(yīng)當(dāng)作潛在生物有害物質(zhì)進(jìn)行處理

5、貯存與穩(wěn)定性

試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的包被板條在三個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定，前提是將包被板條用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。

6、樣品的采集與貯存

血清/血漿（EDTA抗凝）

7、試劑盒組份

8、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）

1）       移液器（Eppendorf移液器或類似儀器,CV＜3%），體積為5μL；100μL；1000μL

2）       漩渦混勻器

3）       37℃孵箱

4）       樣品稀釋用試管（1mL）

5）       帶有儲(chǔ)器的8道移液器。

6）       洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)的包被板洗滌設(shè)備。

7）       可在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）

8）       雙蒸水或去離子水

9）       坐標(biāo)紙，取樣吸頭，記時(shí)器。

9、實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng)

1）       樣品處理不合理或?qū)?shí)驗(yàn)操作進(jìn)行任何改動(dòng)動(dòng)都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。取樣體積、溫育時(shí)間、欲處理步驟都必須嚴(yán)格按說(shuō)明進(jìn)行。只能使用標(biāo)準(zhǔn)移液器和標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。

2）       一旦實(shí)驗(yàn)開始，所有的步驟都必須完整的進(jìn)行下去，不允許中斷。把所有試劑和樣品都拿到18-25℃的實(shí)驗(yàn)室中，在使用前，輕輕搖動(dòng)液體試劑和樣本，試劑混合過(guò)程中要避免氣泡。

3）       請(qǐng)勿接觸試劑、移液器、微孔/試管。加試劑和樣本時(shí)，請(qǐng)使用新的取樣吸頭，以避免交叉污染。不用的試劑應(yīng)用蓋子蓋好，以免重復(fù)使用。

4）       用定標(biāo)儀對(duì)反應(yīng)板進(jìn)行校準(zhǔn)。

5）       溫育時(shí)間會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。微孔加樣的順序和時(shí)間都必須一致。建議使用8道移液器加樣。

6）       包被板的清洗非常重要，微孔清洗不好將會(huì)形成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。建議使用多道移液器或自動(dòng)微孔清洗設(shè)備進(jìn)行清洗。每次溫育間隔期間避免微孔干燥。加洗滌液和吸液時(shí)要避免碰到包被孔。清洗和加試劑時(shí)都應(yīng)特別小心。清洗時(shí)，在微孔中精確的加入洗滌液緩沖液，同時(shí)確保無(wú)微孔中無(wú)殘?jiān)?/p>

7）       濕度會(huì)影響包被板，所以在未到達(dá)室溫時(shí)請(qǐng)勿打開包裝，未使用的包被板要重新密封于裝有干燥劑的包裝袋中。

8）       此實(shí)驗(yàn)也可以在自動(dòng)操作系統(tǒng)上進(jìn)行，具體信息請(qǐng)見(jiàn)“性能"。

10、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說(shuō)明

10.1成分的準(zhǔn)備

10.2樣本稀釋

10.2.1 血清/血漿樣本

樣品中IgG濃度高于ZUI高標(biāo)準(zhǔn)品含量的樣品必須進(jìn)一步稀釋，并重復(fù)檢測(cè)。

10.2.2 腦脊液樣本:按照Reiber法進(jìn)行腦脊液檢測(cè)時(shí),有必要用使血清和腦脊液具有相同的濃度或相同的Cutoff判別范圍（OD值為1-0.1）,通過(guò)下面方式稀釋可以實(shí)現(xiàn):

Cutoff值可以通過(guò)1:101稀釋參數(shù)來(lái)校正,1:401稀釋血清Cutoff值,稀釋度乘以4。1:4稀釋的腦脊液Cutoff值，稀釋度除以25。

如果檢測(cè)樣本的OD值在1.0和0.1之外，則應(yīng)通過(guò)下列稀釋后，再檢測(cè)

11、實(shí)驗(yàn)步驟

1）       將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、稀釋樣本分別100μL加入包被板的微孔中。定性檢測(cè)只需加入標(biāo)準(zhǔn)品B。

2）        蓋板，37℃下溫育60min。

3）        棄取微孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用300ul的已稀釋好的洗滌液洗3次，在吸水紙上將板拍干。

4）        在每一微孔中加入100μL的二抗酶結(jié)合物。

5）        蓋板（新的粘性金屬板），37℃下溫育30分鐘。

6）        棄取微孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用300μL的已稀釋好的洗滌液洗3次，在吸水紙上將板拍干。

7）        如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。

8）        每孔加100μL TMB底物液

9）        18-25℃下避光溫育30min，

10）    每孔加100ulTMB終止液以終止底物反應(yīng)。加終止液后，60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值（參比波長(zhǎng)：600-650nm）

12、質(zhì)量控制

嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果才是有效的。使用者必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室優(yōu)化管理規(guī)定或其他的實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。按照質(zhì)控單的要求，所有的標(biāo)準(zhǔn)品濃度都必須允許范圍內(nèi)。如果其標(biāo)準(zhǔn)不符合要求，則實(shí)驗(yàn)無(wú)效，必須重做。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)使用已知濃度的樣品做進(jìn)一步的有效質(zhì)控。如果實(shí)驗(yàn)背離實(shí)際結(jié)果，應(yīng)檢查以下問(wèn)題：試劑有效期，貯存條件，取樣器，實(shí)驗(yàn)設(shè)備，溫育時(shí)間，清洗方法。

13、結(jié)果計(jì)算：計(jì)算結(jié)果可作定性或者定量判斷

13.1 定性判斷：標(biāo)準(zhǔn)品B的OD值可以作為判斷陰陽(yáng)性結(jié)果的Cutoff值，樣本OD之在Cutoff值上下10%范圍內(nèi)，則結(jié)果位于灰區(qū)內(nèi)，判為可疑。如果高于灰區(qū)則判為陽(yáng)性，低于灰區(qū)則判為陰性。

典型例子：

Cut-off=OD（標(biāo)準(zhǔn)品B，臨界標(biāo)準(zhǔn)品）=0.45

樣本OD=0.60

臨界指標(biāo)（COI）=0.60/0.45=1.33。該樣本判定為陽(yáng)性

13.2定量判斷：在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或用自動(dòng)生成的方法，以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。用立體圖、4參數(shù)對(duì)數(shù)圖或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)圖都可獲得良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，用標(biāo)準(zhǔn)品的每一單值進(jìn)行計(jì)算（樣品結(jié)果明顯異常的值必須刪除掉，應(yīng)使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應(yīng)當(dāng)乘以相應(yīng)的稀釋因子。如果樣品所測(cè)得的濃度高于ZUI高標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說(shuō)明所述對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，并重新檢測(cè)。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

例子，   不能用于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算

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