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重組嵌合抗體定制服務(wù)

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更新時間：2023-10-17 17:21:35瀏覽次數(shù)：1577次

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)地	國產(chǎn)	級別	化工級

嵌合抗體（Chimeric Antibody）是指來源于一種物種的抗體可變區(qū)與另外一種物種的恒定區(qū)片段進行嵌合后形成完整的IgG抗體，如人-鼠，人-兔，鼠-兔，人-羊駝嵌合抗體等。

詳細介紹

嵌合抗體（Chimeric Antibody）是指來源于一種物種的抗體可變區(qū)與另外一種物種的恒定區(qū)片段進行嵌合后形成完整的IgG抗體，如人-鼠，人-兔，鼠-兔，人-羊駝嵌合抗體等。不同物種的嵌合抗體改造主要是為了改善親本抗體的免疫原性，種屬特性，半衰期等特性，其核心訴求是獲得抗體的可變區(qū)序列，借助于噬菌體展示技術(shù)和酵母抗體展示技術(shù)，可以發(fā)現(xiàn)多種物種的單克隆抗體，進而獲得不同來源的嵌合抗體。

圖片5.jpg

2014 年，WHO（世界衛(wèi)生組織）發(fā)布了新指南，重新定義了不同類別的治療性抗體。其 INN（國際非專有名稱）抗體藥物命名法將治療性抗體分為 3 類：嵌合型或"-ximab，人源化或"-zumab，全人源或"-umab。

根據(jù)世衛(wèi)組織命名法對特定抗體進行分類，來源于小鼠（或更普遍的非人類）序列的抗體將被歸類為-祖馬抗體，而來源于人類（噬菌體展示、轉(zhuǎn)基因小鼠或 B 細胞克隆技術(shù)）的抗體將被歸類為-烏馬單抗。在一個標(biāo)準(zhǔn)項目中，與 IMGT 數(shù)據(jù)庫進行 BLAST 的小鼠抗體通常會在 VL 結(jié)構(gòu)域顯示出與較接近的人類種系約 65-80% 的同一性，在 VH 結(jié)構(gòu)域顯示出 60-75% 的同一性。因此，要想在 VH 結(jié)構(gòu)域達到所需的同一率，通常需要對 CDR 中的一些殘基進行突變。因此，在人源化過程中需要對 CDR（根據(jù) Kabat 的定義）進行突變，以達到 VH 結(jié)構(gòu)域 85% 的同一性。

泰克生物是一家專業(yè)的嵌合抗體的構(gòu)建與生產(chǎn)公司，擁有成熟的重組抗體哺乳表達平臺，能為客戶提供高質(zhì)量的嵌合抗體表達定制服務(wù)。全套Gibco無血清哺乳細胞培養(yǎng)，配合來源清晰的293F，CHO懸浮細胞系，整個體系滿足于不同客戶對天然構(gòu)象蛋白的體外重組表達需求。泰克生物為客戶提供的全套高性價比研究服務(wù)滿足GMP-like體系，包括細胞種子庫來源文件記錄體系、細胞種子批檢定，動物源成分的質(zhì)控，標(biāo)準(zhǔn)化細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)化操作流程等。

█ 嵌合抗體的分類

嵌合抗體種類	簡介	嵌合原理
嵌合IgG抗體	在免疫過程中，抗體Fc段能與效應(yīng)細胞發(fā)生相互作用，從而發(fā)揮特異的生物學(xué)功能；IgG1和IgG3與Fc受體的結(jié)合能力較強，IgG4次之，IgG2幾乎檢測不到結(jié)合。	構(gòu)建嵌合抗體首先需從生產(chǎn)鼠源單抗的雜交瘤細胞中得到V區(qū)基因，再與人類的C區(qū)基因重組并克隆到合適載體中，然后轉(zhuǎn)入受體細胞表達。
嵌合Fab和F（ab'）2抗體	該種抗體的優(yōu)勢是滲透力強，由于該類型抗體的親和力較低，分子量小，很容易被腎小球過濾而從血液中消失，因此，大多數(shù)不適合單獨用于臨床治療。	將功能性抗體L，H鏈的V區(qū)基因與人的輕鏈K和H進行重組，然后再轉(zhuǎn)入宿主細胞中表達。

█ 人鼠嵌合抗體構(gòu)建策略

1.模板替換：與鼠對應(yīng)部分有較大同源性的人抗體FR替換鼠FR，利用已有晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)的人源抗體的可變區(qū)框架（VH如NEW，KOL，VL如REI等)用作替換的基本模板或在已有的抗體序列庫中搜尋與鼠McAb FR有同源性的人源FR用于替換。

2.表面重塑：對鼠CDR及FR表面殘基進行鑲飾（veneering）或重塑（resurfacing），以使之類似于人抗體CDR的輪廓（profile）或人 FR 的型式。

3.補償變換：在人FR選擇與CDR有相互作用、與抗體的親和力有密切關(guān)系或?qū)R空間結(jié)構(gòu)折疊起關(guān)鍵作用的殘基進行改變，以補償CDR移植。

4.定位保留：人源化McAb保留了鼠源McAb可變區(qū)中參與抗原結(jié)合的氨基酸殘基，包括CDR和FR中的一些關(guān)鍵殘基。

█ 嵌合抗體設(shè)計與表達服務(wù)周期

步驟	服務(wù)內(nèi)容	周期
基因克隆及載體構(gòu)建	* 擴增/鑒定基因片段或合成目的基因，插入哺乳動物細胞表達質(zhì)粒 * PCR及測序檢測確定亞克隆基因 * 交付：測序數(shù)據(jù)和實驗方案	1-2周
瞬時蛋白表達	* 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞(293F， CHO) ：瞬時表達 * SDS-PAGE和WB檢測 * 交付：表達載體，克隆菌株，重組抗體，純度>85%	2–3周
穩(wěn)定表達（可選）	* 重組蛋白CHO穩(wěn)定表達細胞系構(gòu)建和篩選 * 交付：穩(wěn)定細胞系，構(gòu)建報告；邊際產(chǎn)物，3個克隆，每個克隆50ml發(fā)酵產(chǎn)物及純化產(chǎn)物	12–14周