微球菌核酸酶 (MNase) 的特點(diǎn):
•酶切核酸(DNA 和 RNA)
• 高效處理雙鏈、單鏈、環(huán)狀和線性核酸
•在含有二價(jià)鈣離子的中性至堿緩沖液條件中具有活性
•以 ≥100 單位/µL 的規(guī)格提供,溶于10 mM Tris-HCl(pH 值 7.5)、50 mM NaCl、1 mM EDTA、50% 甘油中
該微球菌核酸酶是衍生酶的一種穩(wěn)定液體形式。微球菌核酸酶 (MNase) 表現(xiàn)出針對(duì) DNA 和 RNA 的外切和內(nèi)切-5'-磷酸二酯酶活性。該酶可消化各種雙鏈、單鏈、環(huán)狀和線性核酸?;钚悦嫦騿捂満怂岬孜铮?yōu)先針對(duì)AT-或AU-富集區(qū)域。酶活性發(fā)生于 pH 值 7 至 10 條件下,且在酶切 RNA 和 DNA 底物方面依賴于鈣。微球菌核酸酶適用于從細(xì)胞裂解物中去除核酸,釋放染色質(zhì)結(jié)合蛋白并剪切染色質(zhì)以便用于染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實(shí)驗(yàn)。
微球菌核酸酶 (MNase) 的特性:
• 產(chǎn)品為 -20°C 的液體。使用期間將酶放置在冰上。
• 微球菌核酸酶活性依賴于 Ca++。在反應(yīng)緩沖液中避免鈣螯合劑,如EGTA。
•在 pH 值為 7 至 10 且鹽濃度小于 100 mM 時(shí),酶具有活性。酶活性發(fā)生在 37°C 下;但在室溫下酶具有活性。單價(jià)金屬離子(如 Na+ 和 K+)會(huì)降低活性。EGTA 或加熱至 65°C 并保持 10 分鐘可使酶失活。
微球菌核酸酶 (MNase) 使用的通用方案:
• 在 50 mM Tris-HCl(pH 值 8.0)、5 mM CaCl2 中稀釋樣品
• 如果樣品僅包含核苷酸(即,無(wú)蛋白),添加 BSA 使其最終濃度為 0.1 mg/mL。
•添加微球菌核酸酶并在 37°C 下孵育反應(yīng),直至核苷酸被降解。
• 可選:通過(guò)添加 EGTA(pH 值 8.0)至最終濃度為 20 mM,停止反應(yīng)。
微球菌核酸酶(產(chǎn)品編號(hào) 88216)的規(guī)格:
• 外觀:透明、無(wú)色液體,不含不可溶物質(zhì)。
•單位:≥100 單位/µL
• 其它信息:1 單位定義為在 25°C 下,高度聚合 DNA 使 260 nm 處吸光度增加 0.001/min/mL 所需的酶量。
相關(guān)產(chǎn)品
Pierce™ 細(xì)胞裂解通用核酸酶