德國(guó)NanoTemper蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析技術(shù)(nanoDSF):PR.48
☆ 高通量:可同時(shí)測(cè)定48個(gè)樣品
☆ 超高數(shù)據(jù)分辨率:每個(gè)樣品采集超過(guò)1000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)
☆ 功能多樣:Tm、Ton、Tagg、Cm、△G、等溫穩(wěn)定性、變復(fù)性等
☆ 檢測(cè)濃度范圍廣:5 µg/ml 到250 mg/ml
☆ 樣品消耗量低:10 µL/樣品
☆ 檢測(cè)不受限制:無(wú)需染料,可在任何類型緩沖液中測(cè)定
☆ 運(yùn)行成本低:耗材價(jià)格低、無(wú)維護(hù)費(fèi)、非常簡(jiǎn)單易操作
Prometheus NT.Plex主要參數(shù):
- 具有多個(gè)檢測(cè)模塊:雙紫外(Dual-UV, 330/350nm)檢測(cè)模塊和背向反射光(Backreflection optics)檢測(cè)模塊;
- 直接檢測(cè)蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光,測(cè)定時(shí)無(wú)需添加染料,不受緩沖液條件限制;
- 測(cè)定參數(shù):Tm、Ton、Cm、ΔG、Tagg;
- 可用于研究蛋白質(zhì)等溫穩(wěn)定性和變溫穩(wěn)定性;
- 可測(cè)定蛋白樣品中變性成分的比例,用于質(zhì)量控制;
- 檢測(cè)通量:每次24個(gè)樣品;
- 樣品體積:10 μL/樣品;
- 樣品濃度范圍:5 μg/mL - 250 mg/mL;
- 上樣方式:機(jī)械臂自動(dòng)上樣;
- 溫控范圍:15-110℃,升溫速度:0.1-7℃/分鐘;
- 數(shù)據(jù)采樣率:每個(gè)樣品每分鐘≥20個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn);
- 儀器無(wú)需定期更換配件,實(shí)驗(yàn)完成后無(wú)需對(duì)儀器進(jìn)行清洗維護(hù)
檢測(cè)原理:
nanoDSF是一種*的差示掃描熒光技術(shù),具有超高分辨率,利用蛋白中色氨酸和酪氨酸自發(fā)熒光檢測(cè)其穩(wěn)定性。它廣泛應(yīng)用于抗體工程、膜蛋白研究、制劑和質(zhì)量控制等領(lǐng)域。蛋白中色氨酸和酪氨酸熒光受其所在微環(huán)境的影響很大,尤其是色氨酸熒光,蛋白結(jié)構(gòu)的變化通常會(huì)影響其強(qiáng)度和發(fā)射波長(zhǎng)。Prometheus 儀器配備的熒光檢測(cè)器可測(cè)定樣品在兩種波長(zhǎng)(350 nm 和 330 nm)下的熒光強(qiáng)度,因而可以靈敏的檢測(cè)到蛋白去折疊過(guò)程中熒光強(qiáng)度和熒光峰值的變化。通過(guò)變性曲線可以得到蛋白穩(wěn)定性的重要參數(shù)。衡量目標(biāo)蛋白的熱穩(wěn)定性可通過(guò)參數(shù)熔融溫度(Tm),即一半蛋白去折疊時(shí)的溫度。