產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶(Trypsin)、 0.02%EDTA和酚紅,不含Ca2+和 Mg2+。該消化液已用 0.22 μm 濾膜過(guò)濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化 1 分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
使用說(shuō)明:
貼壁細(xì)胞的消化:
1、吸去培養(yǎng)液,用無(wú)菌的 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅),略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
3、顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái);此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液;加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
4、 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
5、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g 離心 1 分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
組織的消化:
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):
1、 在使用胰酶細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
2、 胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
保存條件:
4℃保存;長(zhǎng)期貯存于-20℃中;-20℃貯存下保存兩年。