篤瑪 綿羊胎盤催乳素(PL) ELISA 試劑盒 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及其相應(yīng)的解決辦法
1 選擇試劑 選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡至少30分鐘。
2 加樣 可能原因: 1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法: 1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育 可能原因: 1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法: 1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后好在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 顯色 可能原因: 1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑; 2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止 可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板 如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)做好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。
篤瑪 綿羊胎盤催乳素(PL) ELISA 試劑盒 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
標(biāo)準(zhǔn)樣品準(zhǔn)備
1. 移取xx微升 標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F)到新的1.5毫升離心管
2. 加入xx微升 穩(wěn)定液(Reagent B),混勻
3. 放在冰槽里待測(cè)
測(cè)定準(zhǔn)備
1. 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品,置于冰槽里
2. 設(shè)定好分光光度儀:波長(zhǎng)670nm,并置零
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樣品準(zhǔn)備
1. 手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量
2. (選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
3. (選擇步驟)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎組織
5. 放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
6. 加入預(yù)冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 渦旋震蕩5秒,充分混勻
8. 即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約40至80下)
9. 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
10. 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升離心管
12. 加入xx微升 穩(wěn)定液(Reagent B),混勻
~上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。
總部位于上海,并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的。
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